生物素標(biāo)記紅細(xì)胞脫落-再標(biāo)記可能性的研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-19 07:07
目的:探討利用生物素標(biāo)記紅細(xì)胞時(shí)測(cè)定到的紅細(xì)胞存活率不隨時(shí)間下降的原因。方法:雄性C57BL/6供血小鼠1只,腹腔注射10%水合氯醛100μL,待小鼠麻醉后經(jīng)心臟取血迅速采集全血約0.8 mL,在體外進(jìn)行生物素標(biāo)記使紅細(xì)胞生物素化,待紅細(xì)胞標(biāo)記完成后用無菌PBS重懸,制成25%紅細(xì)胞懸液。采血及生物素化過程均保持無菌操作。利用生物素-親和素系統(tǒng)的高親和力,將標(biāo)記紅細(xì)胞與帶熒光基團(tuán)的鏈酶親和素反應(yīng)后,通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)生物素標(biāo)記紅細(xì)胞的標(biāo)記效率。然后將制備好的標(biāo)記紅細(xì)胞經(jīng)尾靜脈回輸至麻醉后的6只受血小鼠體內(nèi),每只小鼠輸入200μL體積的標(biāo)記紅細(xì)胞。分別于輸入后1 h(基礎(chǔ)值)及1、3、7、14、21、28 d通過斷尾法收集5μL血樣,流式細(xì)胞儀測(cè)得各時(shí)點(diǎn)的標(biāo)記紅細(xì)胞比例。以輸入后1h時(shí)標(biāo)記紅細(xì)胞比例作為回輸體內(nèi)的標(biāo)記紅細(xì)胞100%存活,計(jì)算各時(shí)點(diǎn)對(duì)應(yīng)的標(biāo)記紅細(xì)胞存活率。以時(shí)間為橫坐標(biāo),存活率為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)記紅細(xì)胞存活曲線圖,從而進(jìn)一步計(jì)算標(biāo)記紅細(xì)胞的24小時(shí)存活率、半壽命和平均潛在壽命。為進(jìn)一步研究生物素的脫落-再標(biāo)記現(xiàn)象,將生物素直接注入另5只小鼠體內(nèi)進(jìn)行全血標(biāo)記。標(biāo)記48 h后,采...
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英縮略詞對(duì)照表
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3764808
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英縮略詞對(duì)照表
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
本文編號(hào):3764808
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/waikelunwen/3764808.html
最近更新
教材專著