目的:探討高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖相關(guān)骨性關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)小鼠關(guān)節(jié)軟骨NLRP3/caspase-1/IL-1β軸的變化情況及白藜蘆醇(Resveratrol,RES)處理對該軸的效應(yīng),為肥胖相關(guān)OA的營養(yǎng)防治提供理論依據(jù)。方法:SW1353軟骨肉瘤細胞系購于中國科學(xué)院上海生科院細胞資源中心,使用DMEM完全培養(yǎng)基、37℃、5%CO₂、飽和濕度條件下的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并根據(jù)需要用IL-1β及RES進行處理,分組為:DMSO(含2‰DMSO)組、IL-1β(10ng/mL)組、IL-1β(10ng/mL)+RES(50μmol/L)組;C57BL/6小鼠由中國醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供,高脂喂養(yǎng)同時采用溶于0.5%羧甲基纖維素鈉(Carboxymethylcellulose sodium,CMC)的RES(45 mg/kg/d)懸濁液灌胃,分組為:ND(0.5%CMC水溶液灌胃)組、HFD(0.5%CMC水溶液灌胃)組、HFD+RES(0.5%CMC水溶液與RES懸濁液灌胃)組。Western blot法檢測細胞中NLPR3、caspase-1及IL...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞系來源
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SW1353 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 細胞處理
        2.2.3 細胞蛋白提取
        2.2.4 Western blot法檢測細胞中NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表達水平
        2.2.5 動物分組及處理
        2.2.6 動物飼料成分
        2.2.7 動物樣品采集和處理
        2.2.8 軟骨組織形態(tài)學(xué)檢查
        2.2.9 軟骨NLRP3、caspase-1及IL-1βmRNA表達
        2.2.10 軟骨NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表達
    2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 IL-1β處理SW1353 細胞對NLRP3、caspase-1及IL-1β蛋白表達的影響以及RES的效應(yīng)
    3.2 實驗期間各組小鼠體重、體脂比及攝食量變化情況
    3.3 高脂飲食喂養(yǎng)的小鼠膝關(guān)節(jié)組織學(xué)改變及RES的效應(yīng)
    3.4 MMP13 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
    3.5 高脂飲食喂養(yǎng)的小鼠軟骨組織NLRP3、caspase-1及IL-1βmRNA表達以及RES的作用
    3.6 高脂飲食喂養(yǎng)的小鼠軟骨組織NLRP3/caspase-1/IL-1β軸相關(guān)蛋白表達情況及RES的作用
        3.6.1 NLRP3 蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
        3.6.2 Caspase-1 蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
        3.6.3 IL-1β蛋白免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3739668