背景對(duì)于終末期肝病患者來說,現(xiàn)階段最有效的治療手段是肝臟移植,隨著外科技術(shù)的不斷改良和免疫抑制劑的更新?lián)Q代,肝移植患者遠(yuǎn)期存活率有所提高,但臨床上仍有一定比例的患者會(huì)出現(xiàn)圍手術(shù)期風(fēng)險(xiǎn)和術(shù)后肝臟原發(fā)性失功的情況,這是肝移植研究領(lǐng)域亟待解決的難題。冷缺血是移植肝在低溫運(yùn)輸保存期間不可避免的損傷過程,其病理生理過程與術(shù)后肝臟功能恢復(fù)及遠(yuǎn)期預(yù)后密切相關(guān)�，F(xiàn)階段,對(duì)于肝移植的研究大多注重于移植后肝臟的缺血再灌注損傷,對(duì)于肝臟冷保存過程中發(fā)生的損傷變化及機(jī)制缺乏更為細(xì)致全面的研究。目的本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)小鼠移植肝進(jìn)行不同時(shí)間點(diǎn)的冷保存,觀察肝臟發(fā)生的病理學(xué)改變和超微結(jié)構(gòu)變化,并對(duì)肝功能及其相關(guān)損傷指標(biāo),如AST、ALT、MDA、GS、HIF-1α、AQP8和KLF2及其下游基因eNOS進(jìn)行檢測(cè)。試圖揭示移植肝隨著冷保存時(shí)間的延長(zhǎng)相繼出現(xiàn)的損傷及其背后的分子機(jī)制,對(duì)深入了解移植肝冷保存損傷的變化過程及保存措施的研發(fā)有著重要的基礎(chǔ)研究意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。方法（1）建立小鼠肝移植冷保存動(dòng)物模型:取健康的雄性C57BL/6小鼠20只,周齡:8周,隨機(jī)分為4組。原位灌流摘取肝臟后,分別冷保存3個(gè)時(shí)間點(diǎn):（1）正常... 

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
(一) 前言
(二) 材料和方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 主要試劑
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 主要溶液配制
        2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        2.3 肝組織病理制備
        2.4 肝組織電鏡樣品制備
        2.5 肝組織總蛋白提取
        2.6 BCA法蛋白濃度測(cè)定
        2.7 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
        2.8 動(dòng)物組織RNA提取
        2.9 cDNA合成
        2.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.11 肝臟功能檢測(cè)
        2.12 丙二醛(MDA) 含量檢測(cè)
        2.13 糖原(PAS) 染色實(shí)驗(yàn)
        2.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
(三) 結(jié)果
    1.移植肝冷保存損傷的形態(tài)學(xué)變化
    2.冷保存過程中小鼠肝臟再灌流液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT) 、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 及肝臟組織中丙二醛(MDA) 的表達(dá)變化
    3.冷保存過程中小鼠肝臟切片糖原(PAS) 染色及小鼠肝組織糖原合成酶GSmRNA水平表達(dá)變化
    4.冷保存過程中小鼠肝臟KLF2、eNOSmRNA水平表達(dá)變化
    5.冷保存過程中小鼠肝臟HIF-1αmRNA水平表達(dá)變化
    6.冷保存過程中小鼠肝臟AQP8蛋白水平表達(dá)變化
(四) 討論
(五) 結(jié)論
(六) 參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner.  World Journal of Gastroenterology. 2016(18)
[2]硫化物急性毒性對(duì)曼氏無針烏賊幼體血液生理生化指標(biāo)的影響[J]. 尹飛,彭士明,范帆,孫鵬,施兆鴻.  安全與環(huán)境學(xué)報(bào). 2011(04)
[3]Hypoxia inducible factor-1αaccumulation in steatotic liver preservation:Role of nitric oxide[J]. Mohamed Amine Zaouali,Ismail Ben Mosbah,Eleonora Boncompagni,Hassen Ben Abdennebi,Maria Teresa Mitjavila,Ramon Bartrons,Isabel Freitas,Antoni Rimola,Joan Roselló-Catafau.  World Journal of Gastroenterology. 2010(28)
[4]水通道蛋白的表達(dá)及其調(diào)節(jié)[J]. 安宇,張劍釗,李學(xué)軍.  國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2008(05)
[5]Hypoxia inducible factor-1α mediates protective effects of ischemic preconditioning on ECV-304 endothelial cells[J]. Liu-Bin Shi, Jian-Hua Huang, Bao-San Han Department of Organ Transplantation, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China Institute of Integrative Medicine, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China Department of General Surgery, Ruijin Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025, China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(16)

碩士論文
[1]去鐵敏對(duì)大鼠離體心臟STHⅡ液冷保存的影響及HIF-1α基因在其中的作用[D]. 胡許平.瀘州醫(yī)學(xué)院 2014



本文編號(hào)：3733076