為了研究乳腺癌的分子機(jī)制和為乳腺癌治療尋找潛在分子靶標(biāo)。我們首先分析了乳腺癌低氧表達(dá)譜篩選低氧相關(guān)lnc RNA,分析結(jié)果顯示lnc RNA DARS-AS1與lnc RNA MIR210HG在低氧處理后顯著上調(diào)。q RT-PCR實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)lnc RNA DARS-AS1與lnc RNA MIR210HG在乳腺癌及其他多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)且低氧處理后確實(shí)顯著上調(diào)。我們用RACE技術(shù)確定lnc RNA DARS-AS1與lnc RNA MIR210HG末端序列并用PCR擴(kuò)增全長(zhǎng),發(fā)現(xiàn)lnc RNA DARS-AS1與lnc RNA MIR210HG全長(zhǎng)分別為1095 nt和2303 nt。我們分析了TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)的乳腺癌RBP相關(guān)數(shù)據(jù),ALYREF這個(gè)RBP引起了我們的注意。我們對(duì)Kaplan Meier plotter數(shù)據(jù)庫(kù)和TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)lnc RNA DARS-AS1、lnc RNA MIR210HG與ALYREF與乳腺癌及其他腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)。我們利用RNAi技術(shù)沉默目的基因和用慢病毒過(guò)表達(dá)目的基因進(jìn)行細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲和增殖的變化情況。利... 

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 乳腺癌簡(jiǎn)介
    1.2 長(zhǎng)鏈非編碼RNA
    1.3 低氧微環(huán)境
    1.4 RNA結(jié)合蛋白
    1.5 本論文的研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.1.1 儀器與設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)和Kaplan Meier plotter數(shù)據(jù)庫(kù)
        2.2.2 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
第三章 lncRNA MIR210HG、lncRNA DARS-AS1和ALYREF的篩選,以及和臨床關(guān)鍵性指標(biāo)的關(guān)系
    3.1 低氧相關(guān)lncRNA的篩選與驗(yàn)證
    3.2 lncRNA DARS-AS1 與乳腺癌及多種腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)
    3.3 lncRNA MIR210HG與乳腺癌及多種腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)
    3.4 ALYREF與乳腺癌及多種腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)
    3.5 lncRNA DARS-AS1 全長(zhǎng)擴(kuò)增
    3.6 lncRNA MIR210HG全長(zhǎng)擴(kuò)增
    3.7 本章小結(jié)
第四章 lncRNA DARS-AS1與ALYREF在乳腺癌細(xì)胞系的功能研究
    4.1 lncRNA DARS-AS1 在乳腺癌細(xì)胞系中的功能研究
        4.1.1 低氧下沉默lncRNA DARS-AS1 抑制了乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲
        4.1.2 低氧下過(guò)表達(dá)lncRNA DARS-AS1 促進(jìn)了乳腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲
    4.2 ALYREF在乳腺癌細(xì)胞系中的功能研究
        4.2.1 沉默ALYREF抑制了乳腺癌細(xì)胞的增殖能力
        4.2.2 沉默ALYREF影響了乳腺癌細(xì)胞的凋亡和周期
    4.3 本章小結(jié)
第五章 lncRNA DARS-AS1 的分子機(jī)制研究
    5.1 HIF-1α促進(jìn)了lncRNA DARS-AS1 表達(dá)
    5.2 lncRNA DARS-AS1 正反饋調(diào)控HIF通路
    5.3 lncRNA DARS-AS1 低氧后進(jìn)入細(xì)胞核結(jié)合PCBP1 蛋白發(fā)揮功能
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3706059