重組PTD-Cu/Zn SOD對骨癌痛的作用及機制研究
發(fā)布時間:2022-11-10 20:42
目的:骨癌痛(Bone cancer pain,BCP)是癌癥患者的嚴重并發(fā)癥,由于目前缺乏有效的控制手段,因此骨癌痛是目前困擾醫(yī)生和患者的重要臨床問題;钚匝酰≧eactive oxygen species,ROS)是導(dǎo)致癌性疼痛的重要因素,而新型重組融合蛋白PTD-Cu/Zn SOD在前期試驗中被證明具有很好的抗氧化作用,因此該課題欲探究PTD-Cu/Zn SOD對骨癌痛的作用及可能的機制。方法:選取180-220 g的雌性SPF級SD大鼠,隨機分為對照組(Sham)、骨腫瘤組(Carcinoma)、生理鹽水對照組(Ca+NS)、陰性對照病毒組(Ca+LV-NC)、PTD-Cu/Zn SOD組(Ca+PTD-SOD)、Prdx4過表達病毒組(Ca+LV-Prdx4)。通過向右側(cè)脛骨骨髓腔內(nèi)接種Walker256大鼠乳腺癌細胞(5×107個/mL)構(gòu)建骨癌痛模型,Sham組大鼠接種煮沸處理的腫瘤細胞,另五組接種正常腫瘤細胞;Ca+NS組和Ca+PTD-SOD組大鼠通過鞘內(nèi)置管分別注射生理鹽水(20mL)和融合蛋白PTD-Cu/Zn SOD(15mg/20mL),于腿部接種腫瘤細胞后第...
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
主要英文縮略詞表
一、引言
二、材料與方法
2.1 材料
2.1.1 主要試劑
2.1.2 儀器資料
2.1.3 細胞
2.1.4 動物
2.2 方法
2.2.1 原代神經(jīng)元培養(yǎng)
2.2.2 慢病毒的載體構(gòu)建與驗證
2.2.3 骨癌痛模型的建立
2.2.4 重組PTD-Cu/Zn SOD構(gòu)建及鞘內(nèi)應(yīng)用
2.2.5 慢病毒脊髓內(nèi)注射
2.2.6 疼痛行為檢測
2.2.7 取材及標本處理
2.2.8 大鼠脛骨HE染色
2.2.9 組織過氧化氫檢測
2.2.10 Western blot
2.2.11 熒光定量PCR
2.2.12 免疫組化檢測
2.2.13 數(shù)據(jù)分析
三、結(jié)果
3.1 成功構(gòu)建骨癌痛模型
3.2 PTD-Cu/Zn SOD可明顯緩解骨癌痛
3.3 成功構(gòu)建Prdx4過表達慢病毒
3.4 Prdx4在骨癌痛大鼠的脊髓背角的表達下調(diào)
3.5 下調(diào)Prdx4促進骨癌痛的發(fā)生
3.6 在骨癌痛中PTD-Cu/Zn SOD可使Prdx4表達上調(diào)
3.7 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4降低骨癌痛大鼠脊髓中H2O2的含量
3.8 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4可調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)受體的激活
四、討論
五、結(jié)論
六、參考文獻
七、文獻綜述
參考文獻
八、附錄
九、致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于脊髓層面的骨癌痛發(fā)生機制[J]. 杜俊英,房軍帆,梁宜,吳賽飛,陳宜恬,方劍喬. 中國腫瘤. 2014(10)
[2]骨癌痛大鼠初級感覺神經(jīng)元興奮性的研究[J]. 鄭琴,方東,劉敏,姜紅,蔡捷,萬有,邢國剛. 中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志. 2011(03)
[3]骨癌痛外周機制研究進展[J]. 王小微,毛應(yīng)啟梁,王彥青. 國際病理科學(xué)與臨床雜志. 2008(05)
本文編號:3705265
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
主要英文縮略詞表
一、引言
二、材料與方法
2.1 材料
2.1.1 主要試劑
2.1.2 儀器資料
2.1.3 細胞
2.1.4 動物
2.2 方法
2.2.1 原代神經(jīng)元培養(yǎng)
2.2.2 慢病毒的載體構(gòu)建與驗證
2.2.3 骨癌痛模型的建立
2.2.4 重組PTD-Cu/Zn SOD構(gòu)建及鞘內(nèi)應(yīng)用
2.2.5 慢病毒脊髓內(nèi)注射
2.2.6 疼痛行為檢測
2.2.7 取材及標本處理
2.2.8 大鼠脛骨HE染色
2.2.9 組織過氧化氫檢測
2.2.10 Western blot
2.2.11 熒光定量PCR
2.2.12 免疫組化檢測
2.2.13 數(shù)據(jù)分析
三、結(jié)果
3.1 成功構(gòu)建骨癌痛模型
3.2 PTD-Cu/Zn SOD可明顯緩解骨癌痛
3.3 成功構(gòu)建Prdx4過表達慢病毒
3.4 Prdx4在骨癌痛大鼠的脊髓背角的表達下調(diào)
3.5 下調(diào)Prdx4促進骨癌痛的發(fā)生
3.6 在骨癌痛中PTD-Cu/Zn SOD可使Prdx4表達上調(diào)
3.7 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4降低骨癌痛大鼠脊髓中H2O2的含量
3.8 PTD-Cu/Zn SOD和Prdx4可調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)受體的激活
四、討論
五、結(jié)論
六、參考文獻
七、文獻綜述
參考文獻
八、附錄
九、致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于脊髓層面的骨癌痛發(fā)生機制[J]. 杜俊英,房軍帆,梁宜,吳賽飛,陳宜恬,方劍喬. 中國腫瘤. 2014(10)
[2]骨癌痛大鼠初級感覺神經(jīng)元興奮性的研究[J]. 鄭琴,方東,劉敏,姜紅,蔡捷,萬有,邢國剛. 中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志. 2011(03)
[3]骨癌痛外周機制研究進展[J]. 王小微,毛應(yīng)啟梁,王彥青. 國際病理科學(xué)與臨床雜志. 2008(05)
本文編號:3705265
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