背景和目的神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs）具有自我更新和多向分化潛能。在疾病和損傷情況下,NSCs具有增殖、遷移,并向星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元分化的能力,已成為再生研究和神經(jīng)功能損傷修復(fù)的熱點(diǎn),但由于免疫排斥問題及倫理方面的限制,其臨床應(yīng)用仍較困難。隨著細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,已經(jīng)可以做到從胎鼠、成鼠及人類胚胎的多個(gè)區(qū)域分離得到NSCs,但鮮有文獻(xiàn)報(bào)道從成人腦組織中獲取NSCs。本課題通過改良原代培養(yǎng)方法在顱腦手術(shù)患者的廢棄腦組織中分離培養(yǎng)NSCs,體外擴(kuò)增后凍存,建立自體NSCs庫;觀察自體NSC的體外干性維持及譜系發(fā)育過程,并進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化研究,為術(shù)后神經(jīng)功能缺失的顱腦損傷和腦卒中患者提供符合倫理要求的自體NSCs移植平臺(tái)。方法（1）成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的改良原代培養(yǎng):收集25例顱腦手術(shù)中廢棄腦組織各約500 mg,用10ml注射器推出組織至培養(yǎng)皿,滴管輕柔吹打均勻至約10-500μm直徑的組織碎片,離心（1000r/min,5min）棄上清,按1∶40（1 g組織:40 mL完全培養(yǎng)液）添加5 ml完全培養(yǎng)液(DMEM/F12、體積分?jǐn)?shù)2%B₂₇、質(zhì)量濃度20... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1.引言
2.材料與方法
    2.1 主要儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及材料
    2.3 試劑配制
    2.4 臨床資料
    2.5 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的改良培養(yǎng)與傳代擴(kuò)增
        2.5.1 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的改良原代培養(yǎng)
        2.5.2 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的傳代擴(kuò)增
    2.6 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
    2.7 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞及誘導(dǎo)分化后細(xì)胞的鑒定
        2.7.1 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞免疫熒光鑒定
        2.7.2 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化后細(xì)胞的免疫熒光鑒定
        2.7.3 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞及誘導(dǎo)分化后細(xì)胞蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)鑒定
    2.8 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的凍存
    2.9 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的復(fù)蘇
3.結(jié)果
    3.1 廢棄腦組織中成人自體神經(jīng)干細(xì)胞球的生長情況
    3.2 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代擴(kuò)增情況
        3.2.1 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)結(jié)果
        3.2.2 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的傳代培養(yǎng)結(jié)果
    3.3 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化情況
    3.4 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞及誘導(dǎo)分化后細(xì)胞的鑒定結(jié)果
    3.5 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的凍存
    3.6 成人自體神經(jīng)干細(xì)胞的復(fù)蘇后情況
4.討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷
致謝
綜述 神經(jīng)干細(xì)胞的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]神經(jīng)干細(xì)胞治療新生兒膽紅素腦病的進(jìn)展[J]. 李玲,李貴南.  轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
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碩士論文
[1]神經(jīng)干細(xì)胞聯(lián)合GABA能神經(jīng)元移植治療大鼠海水浸泡腦損傷的初步研究[D]. 王偉.南方醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3702430