背景和目的神經(jīng)干細胞（NSCs）具有自我更新和多向分化潛能。在疾病和損傷情況下,NSCs具有增殖、遷移,并向星形膠質細胞、少突膠質細胞和神經(jīng)元分化的能力,已成為再生研究和神經(jīng)功能損傷修復的熱點,但由于免疫排斥問題及倫理方面的限制,其臨床應用仍較困難。隨著細胞生物學技術的發(fā)展,已經(jīng)可以做到從胎鼠、成鼠及人類胚胎的多個區(qū)域分離得到NSCs,但鮮有文獻報道從成人腦組織中獲取NSCs。本課題通過改良原代培養(yǎng)方法在顱腦手術患者的廢棄腦組織中分離培養(yǎng)NSCs,體外擴增后凍存,建立自體NSCs庫;觀察自體NSC的體外干性維持及譜系發(fā)育過程,并進行定向誘導分化研究,為術后神經(jīng)功能缺失的顱腦損傷和腦卒中患者提供符合倫理要求的自體NSCs移植平臺。方法（1）成人自體神經(jīng)干細胞的改良原代培養(yǎng):收集25例顱腦手術中廢棄腦組織各約500 mg,用10ml注射器推出組織至培養(yǎng)皿,滴管輕柔吹打均勻至約10-500μm直徑的組織碎片,離心（1000r/min,5min）棄上清,按1∶40（1 g組織:40 mL完全培養(yǎng)液）添加5 ml完全培養(yǎng)液(DMEM/F12、體積分數(shù)2%B₂₇、質量濃度20... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
1.引言
2.材料與方法
    2.1 主要儀器設備
    2.2 實驗試劑及材料
    2.3 試劑配制
    2.4 臨床資料
    2.5 成人自體神經(jīng)干細胞的改良培養(yǎng)與傳代擴增
        2.5.1 成人自體神經(jīng)干細胞的改良原代培養(yǎng)
        2.5.2 成人自體神經(jīng)干細胞的傳代擴增
    2.6 成人自體神經(jīng)干細胞的誘導分化
    2.7 成人自體神經(jīng)干細胞及誘導分化后細胞的鑒定
        2.7.1 成人自體神經(jīng)干細胞免疫熒光鑒定
        2.7.2 成人自體神經(jīng)干細胞誘導分化后細胞的免疫熒光鑒定
        2.7.3 成人自體神經(jīng)干細胞及誘導分化后細胞蛋白質免疫印跡技術鑒定
    2.8 成人自體神經(jīng)干細胞的凍存
    2.9 成人自體神經(jīng)干細胞的復蘇
3.結果
    3.1 廢棄腦組織中成人自體神經(jīng)干細胞球的生長情況
    3.2 成人自體神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)與傳代擴增情況
        3.2.1 成人自體神經(jīng)干細胞的原代培養(yǎng)結果
        3.2.2 成人自體神經(jīng)干細胞的傳代培養(yǎng)結果
    3.3 成人自體神經(jīng)干細胞的誘導分化情況
    3.4 成人自體神經(jīng)干細胞及誘導分化后細胞的鑒定結果
    3.5 成人自體神經(jīng)干細胞的凍存
    3.6 成人自體神經(jīng)干細胞的復蘇后情況
4.討論
結論
參考文獻
個人簡歷
致謝
綜述 神經(jīng)干細胞的研究進展
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]神經(jīng)干細胞治療新生兒膽紅素腦病的進展[J]. 李玲,李貴南.  轉化醫(yī)學雜志. 2017(03)
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[10]運動訓練對腦梗死大鼠側腦室室管膜下區(qū)內(nèi)源性神經(jīng)干細胞遷移的影響及其機制[J]. 羅婧,胡昔權,張麗穎,李莉莉,鄭海清,張青杰.  中國康復醫(yī)學雜志. 2014(04)

碩士論文
[1]神經(jīng)干細胞聯(lián)合GABA能神經(jīng)元移植治療大鼠海水浸泡腦損傷的初步研究[D]. 王偉.南方醫(yī)科大學 2017



本文編號：3702430