杜興肌肉萎縮癥（Duchenne Muscular Dystrophy,DMD）是一種伴X染色體連鎖隱性遺傳的影響神經(jīng)和肌肉的系統(tǒng)性疾病,主要發(fā)病原因?yàn)镈MD基因突變引起dystrophin蛋白缺失,肌肉細(xì)胞膜發(fā)生破損,肌肉出現(xiàn)進(jìn)行性退化,導(dǎo)致病人死亡,DMD病人的平均壽命約為20歲。目前對(duì)DMD缺乏有效的治療手段,唯一被批準(zhǔn)用于臨床的反義寡核苷酸藥物PMO（phosphorodiamidate morpholino oligomers）存在系統(tǒng)運(yùn)輸效率低、用藥量大、價(jià)格昂貴等問(wèn)題。針對(duì)這些問(wèn)題,我們利用DMD疾病模型mdx小鼠篩選營(yíng)養(yǎng)物,以期獲得能夠促進(jìn)PMO活性及改善DMD病理的新型佐劑�；谡n題組前期的局部篩選結(jié)果,本論文選擇了局部篩選效果較好的三種營(yíng)養(yǎng)物（A1-A3）,在mdx小鼠上系統(tǒng)評(píng)估這三種營(yíng)養(yǎng)物對(duì)PMO活性的作用及對(duì)肌肉組織形態(tài)、炎癥、纖維化、新生和退化進(jìn)程等的影響;為進(jìn)一步明確候選營(yíng)養(yǎng)物的長(zhǎng)期有效性及安全性,我們?cè)趍dx小鼠上進(jìn)行了較為長(zhǎng)期的系統(tǒng)研究,以期為其臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。測(cè)試結(jié)果表明,在成年mdx小鼠上,通過(guò)尾靜脈系統(tǒng)注射營(yíng)養(yǎng)物A1和25mg/kg... 

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
對(duì)象和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要儀器設(shè)備
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
        1.1.4 主要分析工具軟件
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 試劑配制
        1.2.2 動(dòng)物注射
        1.2.3 組織蛋白提取與檢測(cè)
        1.2.4 組織RNA提取
        1.2.5 組織免疫熒光染色(dystrophin蛋白)
        1.2.6 組織免疫熒光染色(nNOS蛋白)
        1.2.7 新生肌肉纖維e MyHC染色
        1.2.8 免疫球蛋白染色(IgG)
        1.2.9 肌肉病理狀態(tài)檢測(cè)-蘇木素&伊紅染色(H&E staining)
        1.2.10 免疫炎性細(xì)胞檢測(cè)(CD68+巨噬細(xì)胞)
        1.2.11 抓力及體重檢測(cè)
        1.2.12 血清檢測(cè)
        1.2.13 跑輪實(shí)驗(yàn)
        1.2.14 膠原染色(Masson’s trichrome staining)
        1.2.15 肝腎組織石蠟切片
        1.2.16 石蠟組織切片H&E染色
        1.2.17 定量分析蛋白表達(dá)水平
        1.2.18 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
2.1 在mdx小鼠上對(duì)營(yíng)養(yǎng)物A1 促進(jìn)PMO的活性研究
    2.1.1 PMO-A1對(duì)mdx小鼠肌肉中dystrophin恢復(fù)的效果測(cè)試
    2.1.2 PMO-A1對(duì)mdx小鼠肌肉病理狀態(tài)的影響
2.2 在mdx小鼠上對(duì)營(yíng)養(yǎng)物A2 促進(jìn)PMO的活性研究
    2.2.1 PMO-A2對(duì)mdx小鼠肌肉dystrophin恢復(fù)效果的測(cè)試
    2.2.2 PMO-A2對(duì)mdx小鼠肌肉的病理改善作用研究
    2.2.3 對(duì)A2 使用劑量的優(yōu)化探究
2.3 在mdx小鼠上對(duì)營(yíng)養(yǎng)物A3 促進(jìn)PMO的活性研究
    2.3.1 PMO-A3對(duì)mdx小鼠肌肉dystrophin恢復(fù)的效果測(cè)試
    2.3.2 PMO-A3 給藥方案的優(yōu)化
    2.3.3 優(yōu)化后PMO-A3對(duì)mdx小鼠肌肉病理改善作用
2.4 營(yíng)養(yǎng)物A3對(duì)mdx小鼠的作用效果探究
    2.4.1 營(yíng)養(yǎng)物A3對(duì)mdx小鼠肌肉組織病理的改善作用
    2.4.2 營(yíng)養(yǎng)物A3對(duì)mdx小鼠長(zhǎng)期治療效果研究
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 杜興肌肉萎縮癥病理改善的治療研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3684392