目的觀察成纖維細(xì)胞生長因子-2/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸/骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（FGF-2/PELA/BMP-2）微囊支架對SD大鼠骨膜來源干細(xì)胞成骨分化作用。方法提取SD大鼠骨膜來源干細(xì)胞（PDSC）,進(jìn)行流式細(xì)胞學(xué)表面標(biāo)記物鑒定及成骨、成軟骨、成脂三系誘導(dǎo)并進(jìn)行茜素紅、甲苯胺藍(lán)、阿利新藍(lán)、油紅O染色及免疫熒光實(shí)驗。制備FGF-2/PELA/BMP-2、FGF-2/PELA、PELA/BMP-2、PELA四組材料,進(jìn)行掃描電鏡（SEM）觀察微囊表面,通過ELISA實(shí)驗制作兩因子的控釋曲線。將4組材料浸提液與第3代骨膜來源干細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng),分別在7、14 d進(jìn)行堿性磷酸酶（AKP）活性檢測,分別在7、14、21 d進(jìn)行q RT-PCR成骨基因表達(dá)檢測,觀察比較各組PDSC成骨分化能力,數(shù)據(jù)匯總后進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果流式細(xì)胞學(xué)表面標(biāo)記物鑒定顯示PDSC表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物,三系誘導(dǎo)分化染色結(jié)果表面PDSC具有成骨、成軟骨、成脂等多向分化能力。AKP活性結(jié)果顯示,FGF-2/PELA/BMP-2組在PDSC培養(yǎng)的7 d及14 d,AKP活性最高,差異顯著。FGF-2/PELA/BMP-... 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 PDSC的分離、培養(yǎng)
    1.2 PDSC的流式細(xì)胞學(xué)檢測
    1.3 PDSC細(xì)胞骨架免疫熒光及成骨、成軟骨、成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗
    1.4 PELA微囊支架制備
    1.5 FGF-2/PELA/BMP-2微囊支架體外釋放檢測
    1.6 支架浸提液促進(jìn)PDSC成骨分化實(shí)驗
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 PDSC原代培養(yǎng)及流式鑒定結(jié)果:
    2.2 PDSC細(xì)胞骨架免疫熒光及三系誘導(dǎo)結(jié)果
    2.3 掃描電鏡觀察微囊支架及熒光顯微鏡觀察模型微囊結(jié)果
    2.4 體外BMP-2/FGF-2釋放研究
    2.5 AKP活性檢測結(jié)果
    2.6 q RT-PCR成骨基因表達(dá)結(jié)果
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