背景和目的:椎間盤退變廣泛存在于各年齡段人群,髓核細胞的老化在臨床脊柱事件中起到了關(guān)鍵的影響。前期研究發(fā)現(xiàn),在不同退變程度的髓核組織中,間充質(zhì)干細胞表型呈代償性上調(diào)。受局部解剖結(jié)構(gòu)的限制,在終末期逐漸降低。此前較多研究表明,間充質(zhì)干細胞對退變髓核細胞的老化有部分緩解能力,并能增強其細胞活力。然而干細胞旁分泌作用觸發(fā)了髓核細胞的何種保護性應答較少報道。因此,本研究以此為切入點,探究三維共培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞對髓核細胞老化的影響以及下游可能的發(fā)生機制。研究方法:1.研究不同退變程度的髓核臨床組織標本以及構(gòu)建的大鼠尾椎退變模型中間充質(zhì)干細胞表型的變化與臨床分級指標之間的關(guān)系。2.構(gòu)建不同細胞密度的三維共培養(yǎng)體系,觀察間充質(zhì)干細胞對退變髓核細胞老化的緩解和影響。3.為研究間充質(zhì)干細胞對髓核細胞所引起的廣泛而復雜的變化,利用RNA-seq技術(shù),通過分析目的細胞在細胞合成以及信號通路上的改變,用以確定間充質(zhì)干細胞對髓核細胞可能的靶點。4.基于前期的研究結(jié)果,對與髓核細胞顯著改變的ZMPSTE24基因,采用crispr cas9基因編輯技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定的ZMPSTE24敲除髓核細胞株,在體外實驗中觀察ZM... 

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
緒論
第一部分 間充質(zhì)干細胞表型與細胞老化程度的相關(guān)性
    1.1 引言
    1.2 材料與方法
    1.3 結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
第二部分 三維狀態(tài)間充質(zhì)干細胞對退變髓核細胞活性和功能影響
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三部分 間充質(zhì)干細胞對老化髓核細胞的轉(zhuǎn)錄保護作用
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
    3.3 結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四部分 ZMPSTE24 在老化髓核細胞中的影響及與炎性通路的聯(lián)系
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
    4.3 結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五部分 器官培養(yǎng)中間充質(zhì)干細胞延緩椎間盤退變
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
    5.3 結(jié)果
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
6.全文結(jié)論
7.參考文獻
8.致謝
9.科研成果目錄


【參考文獻】：
期刊論文
[1]過早衰老髓核細胞微環(huán)境中BMSCs的生物學行為研究[J]. 王運濤,吳小濤,王鋒,洪鑫,鮑軍平,朱磊.  中國修復重建外科雜志. 2014(06)



本文編號：3650392