目的:在成熟的骨骼中,骨骼代謝的過程是由新的骨組織逐漸代替舊的骨組織以及受損的骨組織,骨骼代謝的新組織提供鈣和磷的來源以維持骨骼的健康。為了適應機體的機械負荷和生長,骨組織不斷地進行自我代謝重塑以維持礦物質(zhì)鹽的代謝平衡。破骨細胞起源于血系單核—巨噬系統(tǒng),是由多個單核細胞聚集融合而成的多核巨細胞。一些研究表明破骨細胞活性的病理性過度表達是引起骨質(zhì)代謝紊亂的主要原因。天然植物提取物作為一種潛在的預防和治療人類疾病的藥物,因其取材廣泛、副作用較小的特點近年來受到了越來越多的關注。柳穿魚黃素主要來源于中藥材菊科薊屬植物的干燥地上部分,屬于一種黃酮類的化合物,已被證實具有許多生物學功效。因此,本實驗的主要目的是研究天然植物提取物柳穿魚黃素對破骨細胞分化調(diào)節(jié)的影響,并盡可能的闡述這種作用潛在的細胞分子機制,以期為由破骨細胞引起的相關骨量減少、骨質(zhì)疏松癥以及骨轉(zhuǎn)移等諸多疾病的治療提供更加有效、可靠的方法。方法:1.通過大鼠骨髓源性巨噬細胞建立破骨細胞誘導培養(yǎng)體系:選取大鼠的股骨和脛骨等長骨獲得骨髓原始細胞,用含重組RANKL和M-CSF的培養(yǎng)基補充營養(yǎng)、刺激細胞完成定向分化;2.通過抗酒石酸酸性磷酸... 

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英縮寫詞對照表
摘要
abstract
引言
第一章 材料和方法
    1.1 試劑和抗體
    1.2 BMMs的分離和培養(yǎng)
    1.3 破骨細胞的定向分化
    1.4 細胞染色和吸光度測定
    1.5 定量實時逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應
    1.6 蛋白印跡分析
    1.7 骨吸收試驗和肌動蛋白環(huán)
    1.8 統(tǒng)計分析
第二章 結(jié)果
    2.1 柳穿魚黃素可以抑制體外破骨細胞的分化且無毒性
    2.2 柳穿魚黃素在體外細胞培養(yǎng)過程中減少骨吸收
    2.3 柳穿魚黃素抑制RANKL介導的c-Fos/NFATc1 活性表達
    2.4 柳穿魚黃素通過抑制MAPKs相關信號通路磷酸化的表達活性來抑制破骨細胞分化生成
第三章 討論
第四章 全文總結(jié)
第五章 展望
參考文獻
附錄
致謝
攻讀學位期間研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3646373