移植過表達SDF-1α的骨髓間充質(zhì)干細胞治療大鼠脊髓損傷的實驗研究
發(fā)布時間:2022-02-18 22:49
目的在課題組前期的BMSCs體外遷移研究基礎(chǔ)上,通過建立SCI大鼠模型,觀察過表達SDF-1α的BMSCs向脊髓受損區(qū)域的遷移情況,同時觀察SCI后大鼠的雙后肢運動功能的恢復情況及對受損脊髓組織病理結(jié)構(gòu)的修復作用,進一步探討過表達SDF-1α的BMSCs的體內(nèi)遷移作用及其對SCI的療效。方法1、密度梯度離心法提取原代BMSCs,培養(yǎng)至第二代采用流式檢測其細胞表型;構(gòu)建穩(wěn)定過表達SDF-1α的BMSCs系(SDF-1α-BMSCs),同時建立空載體的BMSCs(null-BMSCs)和SDF-1α沉默的BMSCs(siRNA-BMSCs)兩種細胞系作為對照。2、改良Allen方法構(gòu)建SCI大鼠模型,將實驗動物分為六組:Control組、Sham組、PBS組、null-BMSCs移植組、SDF-1α-BMSCs移植組和siRNA-BMSCs移植組,造模成功后,使用BBB評分表評估大鼠的雙后肢運動功能恢復情況。3、(1)組織病理切片HE染色觀察分析移植過表達SDF-1α的BMSCs對大鼠受損脊髓組織形態(tài)的影響。(2)Western blot方法檢測各組大鼠脊髓組織內(nèi)的SDF-1α和CXCR4...
【文章來源】:福建醫(yī)科大學福建省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表
摘要
Abstract
前言
第一部分 建立過表達SDF-1α的骨髓間充質(zhì)干細胞系
材料與方法
1、材料
2、方法
結(jié)果
1、BMSCs的培養(yǎng)與鑒定
1.1 BMSCs的培養(yǎng)
1.2 BMSCs的鑒定
2、慢病毒感染BMSCs
討論
小結(jié)
第二部分 脊髓損傷動物模型的建立及雙后肢運動功能評分
材料與方法
1、材料
2、方法
3、數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
1、脊髓損傷動物模型的建立
1.1 SCI動物模型的構(gòu)建
1.2 SCI前大鼠的一般情況
1.3 SCI后大鼠的一般情況
2、BBB評分結(jié)果
討論
小結(jié)
第三部分 過表達SDF-1α對骨髓間充質(zhì)干細胞體內(nèi)遷移作用的實驗研究
材料與方法
1、材料
2、方法
3、數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
1、BBB評分結(jié)果(見第二部分)
2、HE染色觀察脊髓的病理改變
3、Western blot檢測SDF-1α和 CXCR4 的蛋白含量
4、熒光顯微鏡下觀察BMSCs的遷移情況
5、激光共聚焦顯微鏡下觀察SCI前后SDF-1α和 CXCR4 陽性細胞在脊髓內(nèi)的空間分布
討論
小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Jisuikang, a Chinese herbal formula, increases neurotrophic factor expression and promotes the recovery of neurological function after spinal cord injury[J]. Yang Guo,Yong Ma,Ya-lan Pan,Su-yang Zheng,Jian-wei Wang,Gui-cheng Huang. Neural Regeneration Research. 2017(09)
[2]醫(yī)學生正念與心理彈性的關(guān)系:抑郁、焦慮的中介作用[J]. 徐鑫,吳大興,趙曉華,陳俊香,盧樟秀,陳優(yōu)巧. 中國健康心理學雜志. 2016(11)
[3]脊髓損傷大鼠痙攣腓腸肌超聲彈性成像特征與其病理學特征的相關(guān)性[J]. 姜麗,王巧緣,衛(wèi)小梅,張耀文,于帆,戴萌,喻勇,竇祖林. 中國醫(yī)學影像技術(shù). 2016(03)
[4]改良鉗夾型脊髓損傷大鼠模型的建立及神經(jīng)功能評價[J]. 秦慧慧,王文春,葛杜鵑,龐日朝,李蓓,袁青,柯曉華,劉素貞,劉建成,崔銀潔,張安仁. 西南軍醫(yī). 2014(01)
[5]Lentivirus carrying the Atoh1 gene infects normal rat cochlea[J]. Song Pan,Jingzhi Wan,Shaosheng Liu,Song Zhang,Hao Xiong,Jun Zhou,Wu Xiong,Kunfei Yu,Yong Fu. Neural Regeneration Research. 2013(17)
[6]脊髓缺血再灌注損傷模型的改進及對大鼠神經(jīng)行為學的影響[J]. 金華,郭光瓊,李江,肖高鵬,趙強,李艷華. 中風與神經(jīng)疾病雜志. 2012(10)
[7]Construction of a recombinant lentivirus containing human microRNA-7-3 and its inhibitory effects on glioma proliferation[J]. Lun Dong 1 , Chongxu Han 2 , Hengzhu Zhang 1 , Xuewen Gu 3 , Jian Li 1 , Yongkang Wu 1 , Xiaodong Wang 11 Department of Neurosurgery, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China 2 Central Laboratory, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China 3 Department of Pathology, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China. Neural Regeneration Research. 2012(27)
[8]神經(jīng)營養(yǎng)素-3基因修飾骨髓間充質(zhì)干細胞的明膠海綿圓柱體支架移植促進大鼠全橫斷脊髓損傷部分結(jié)構(gòu)和功能修復的研究[J]. 盧麗雅,張巍,曾園山,曾湘,何兵,黃斯凡,李燕. 中國康復醫(yī)學雜志. 2011(07)
[9]大鼠脊髓損傷后膠質(zhì)瘢痕形成的病理學規(guī)律[J]. 張海燕,楊朝陽,李曉光. 中國康復理論與實踐. 2011(03)
[10]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞及其誘導分化[J]. 蔡鵬,朱紹興,蘇一鳴,黃世勇. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(36)
本文編號:3631696
【文章來源】:福建醫(yī)科大學福建省
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表
摘要
Abstract
前言
第一部分 建立過表達SDF-1α的骨髓間充質(zhì)干細胞系
材料與方法
1、材料
2、方法
結(jié)果
1、BMSCs的培養(yǎng)與鑒定
1.1 BMSCs的培養(yǎng)
1.2 BMSCs的鑒定
2、慢病毒感染BMSCs
討論
小結(jié)
第二部分 脊髓損傷動物模型的建立及雙后肢運動功能評分
材料與方法
1、材料
2、方法
3、數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
1、脊髓損傷動物模型的建立
1.1 SCI動物模型的構(gòu)建
1.2 SCI前大鼠的一般情況
1.3 SCI后大鼠的一般情況
2、BBB評分結(jié)果
討論
小結(jié)
第三部分 過表達SDF-1α對骨髓間充質(zhì)干細胞體內(nèi)遷移作用的實驗研究
材料與方法
1、材料
2、方法
3、數(shù)據(jù)分析
結(jié)果
1、BBB評分結(jié)果(見第二部分)
2、HE染色觀察脊髓的病理改變
3、Western blot檢測SDF-1α和 CXCR4 的蛋白含量
4、熒光顯微鏡下觀察BMSCs的遷移情況
5、激光共聚焦顯微鏡下觀察SCI前后SDF-1α和 CXCR4 陽性細胞在脊髓內(nèi)的空間分布
討論
小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Jisuikang, a Chinese herbal formula, increases neurotrophic factor expression and promotes the recovery of neurological function after spinal cord injury[J]. Yang Guo,Yong Ma,Ya-lan Pan,Su-yang Zheng,Jian-wei Wang,Gui-cheng Huang. Neural Regeneration Research. 2017(09)
[2]醫(yī)學生正念與心理彈性的關(guān)系:抑郁、焦慮的中介作用[J]. 徐鑫,吳大興,趙曉華,陳俊香,盧樟秀,陳優(yōu)巧. 中國健康心理學雜志. 2016(11)
[3]脊髓損傷大鼠痙攣腓腸肌超聲彈性成像特征與其病理學特征的相關(guān)性[J]. 姜麗,王巧緣,衛(wèi)小梅,張耀文,于帆,戴萌,喻勇,竇祖林. 中國醫(yī)學影像技術(shù). 2016(03)
[4]改良鉗夾型脊髓損傷大鼠模型的建立及神經(jīng)功能評價[J]. 秦慧慧,王文春,葛杜鵑,龐日朝,李蓓,袁青,柯曉華,劉素貞,劉建成,崔銀潔,張安仁. 西南軍醫(yī). 2014(01)
[5]Lentivirus carrying the Atoh1 gene infects normal rat cochlea[J]. Song Pan,Jingzhi Wan,Shaosheng Liu,Song Zhang,Hao Xiong,Jun Zhou,Wu Xiong,Kunfei Yu,Yong Fu. Neural Regeneration Research. 2013(17)
[6]脊髓缺血再灌注損傷模型的改進及對大鼠神經(jīng)行為學的影響[J]. 金華,郭光瓊,李江,肖高鵬,趙強,李艷華. 中風與神經(jīng)疾病雜志. 2012(10)
[7]Construction of a recombinant lentivirus containing human microRNA-7-3 and its inhibitory effects on glioma proliferation[J]. Lun Dong 1 , Chongxu Han 2 , Hengzhu Zhang 1 , Xuewen Gu 3 , Jian Li 1 , Yongkang Wu 1 , Xiaodong Wang 11 Department of Neurosurgery, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China 2 Central Laboratory, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China 3 Department of Pathology, Clinical Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu Province, China. Neural Regeneration Research. 2012(27)
[8]神經(jīng)營養(yǎng)素-3基因修飾骨髓間充質(zhì)干細胞的明膠海綿圓柱體支架移植促進大鼠全橫斷脊髓損傷部分結(jié)構(gòu)和功能修復的研究[J]. 盧麗雅,張巍,曾園山,曾湘,何兵,黃斯凡,李燕. 中國康復醫(yī)學雜志. 2011(07)
[9]大鼠脊髓損傷后膠質(zhì)瘢痕形成的病理學規(guī)律[J]. 張海燕,楊朝陽,李曉光. 中國康復理論與實踐. 2011(03)
[10]全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞及其誘導分化[J]. 蔡鵬,朱紹興,蘇一鳴,黃世勇. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(36)
本文編號:3631696
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