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持續(xù)與間歇低載荷機械振動作用下Wnt/β-catenin信號通路對骨折愈合影響的實驗研究

發(fā)布時間:2022-02-17 10:10
  研究背景和目的:骨骼在人體起著支撐身體的作用,隨著人們生活水平的提高和醫(yī)療水平的發(fā)展,人均壽命普遍延長,骨質疏松癥和各種原因導致骨折的患者也逐年增多。對于一些重大車禍、手術導致的骨折延遲愈合和骨折不愈合是困擾骨科醫(yī)生的一個重要課題。有研究表明老年骨折中骨質疏松導致骨折的概率為69.4%。臨床上對骨質疏松及骨折的治療大多是使用藥物和手術治療,雖然具有一定的療效,但是也帶來的很多副作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)適當?shù)膽Υ碳た梢源龠M骨形成,但是不同的應力刺激強度及頻率影響成骨的效果不同。近些年來有關實驗研究證實持續(xù)與間歇低載荷機械振動(頻率32-37Hz,加速度0.2-0.3g)可以促進骨的成長、促進骨折愈合,對抗骨質疏松。我們課題組已經(jīng)在低載荷機械振動促進骨生長、對抗骨質疏松方面進行了多年的研究,本課題主要是在間歇低載荷機械振動加載條件下,從Wnt/β-catenin信號通路、通路的特異性阻斷劑Dkk1、細胞骨架等方面對間歇低載荷振動促進MC3T3-E1細胞成骨機制做出研究。為今后臨床工作中治療骨質疏松及促進骨折愈合提供一種新的治療思路和理論支持。實驗方法:1、持續(xù)與間歇低載荷機械振動對MC3T3... 

【文章來源】:吉林大學吉林省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
abstract
第1章 緒論
第2章 應力刺激促進骨質疏松性骨折愈合研究進展的綜述
    2.1 應力刺激對骨質疏松和骨折愈合的影響
        2.1.1 應力刺激對抗骨質疏松影響的研究
        2.1.2 應力刺激對骨折愈合的影響
    2.2 應力刺激對成骨細胞信號通路的影響
        2.2.1 鈣離子通路
    2.3 應力刺激對成骨細胞細胞代謝和細胞因子的調控
        2.3.1 轉化生成因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)
        2.3.2 胰島素樣生長因子I(Insulin-likeGrowthFactor-I,IGF-I)
        2.3.3 堿性磷酸酶(ALP)
    2.4 展望
第3章 持續(xù)與間歇低載荷機械振動對MC3T3-E1細胞內經(jīng)典Wnt信號通路、Runx2因子的調控
    3.1 材料與方法
        3.1.1 細胞
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 相關試劑配置
    3.2 實驗方法
        3.2.1 MC3T3-E1細胞培養(yǎng)
        3.2.2 MC3T3-E1細胞的凍存
        3.2.3 實驗分組及振動加載
        3.2.4 RT-qPCR檢測β-catenin、Runx2mRNA表達水平
        3.2.5 Western-blot檢測β-catenin蛋白水平變化
    3.3 統(tǒng)計方法
    3.4 結果
    3.5 討論
第4章 間歇低載荷機械振動作用下Wnt/β-catenin信號通路對MC3T3-E1細胞成骨效應的調控
    4.1 材料與方法
        4.1.1 細胞
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 相關試劑配置
    4.2 實驗方法
        4.2.1 MC3T3-E1細胞培養(yǎng)
        4.2.2 MC3T3-E1細胞的凍存
        4.2.3 實驗分組及振動加載
        4.2.4 RT-qPCR檢測cyclinD1mRNA,β-cateninmRNA,COLⅠmRNA,OCNmRNA,Runx2mRNA的表達水平
        4.2.5 Western-blot法檢測各組COLⅠ蛋白、OCN蛋白、β-catenin蛋白、Runx2蛋白表達水平
        4.2.6 免疫熒光法檢測細胞內β-catenin蛋白分布的影響
        4.2.7 激光共聚焦顯微鏡觀察間歇低載荷機械振動對MC3T3-E1細胞細胞骨架的影響
    4.3 統(tǒng)計方法
    4.4 結果
        4.4.1 間歇低載荷機械振動、DKK1對MC3T3-E1細胞內Wnt/β-catenin信號通路相關基因的調控
        4.4.2 間歇低載荷機械振動、DKK1對MC3T3-E1細胞成骨相關蛋白的調控
        4.4.3 間歇低載荷機械振動、DKK1對MC3T3-E1細胞內β-catenin蛋白分布的影響
        4.4.4 間歇低載荷機械振動對MC3T3-E1細胞細胞骨架的影響
    4.5 討論
第5章 結論
參考文獻
作者簡介及在學校期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞外信號調節(jié)蛋白激酶1/2在介導周期性牽張力對牙周膜細胞成骨分化中的作用[J]. 宋京,任大鵬,顏世果,藍菁,袁曉,郭慶圓,戚向敏.  華西口腔醫(yī)學雜志. 2017(05)
[2]低載荷機械振動對小鼠MC3T3-E1細胞增殖的影響[J]. 閆利,閆玉仙.  中華實用診斷與治療雜志. 2016(07)
[3]動載荷作用下骨重建力學調控機制[J]. 馬宗民,李淑嫻.  醫(yī)用生物力學. 2015(04)
[4]張應力刺激下Wnt/β-catenin信號通路對成牙骨質細胞Runx2表達調控的體外研究[J]. 李書琴,楊珊,任嬡姝,戴紅衛(wèi).  華西口腔醫(yī)學雜志. 2015(01)
[5]振動應力刺激骨髓間充質干細胞修復兔骨缺損[J]. 張路,趙文志,何盛為,方旭,米立東,孫雪剛,杜廣宇,孫傳秀.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(40)
[6]機械拉伸對成骨細胞增殖及IGF-1 mRNA表達的影響[J]. 鮮成玉,王遠亮,張兵兵,唐麗靈.  生物醫(yī)學工程學雜志. 2007(02)
[7]腺病毒介導的人骨形成蛋白2基因轉染促進下頜牽張成骨的實驗研究[J]. 陳安威,魏奉才,王克濤,孫善珍,劉少華.  中華口腔醫(yī)學雜志. 2007(01)
[8]機械牽張力對成骨細胞堿性磷酸酶及骨鈣蛋白的影響[J]. 唐林,林珠,李永明.  臨床口腔醫(yī)學雜志. 2005(11)
[9]核心結合因子α1對骨髓間充質干細胞成骨細胞標志基因表達的影響[J]. 董世武,應大君,段小軍,朱楚洪,劉光久,糜建紅.  中國修復重建外科雜志. 2005(09)
[10]機械張力對人成骨樣細胞TGF-β表達的影響[J]. 鄒淑娟,胡靜.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學雜志. 2002(03)

碩士論文
[1]機械應力作用下促進骨不連愈合的療效觀察[D]. 李尚志.山東大學 2015



本文編號:3629249

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