研究背景和目的:骨骼在人體起著支撐身體的作用,隨著人們生活水平的提高和醫(yī)療水平的發(fā)展,人均壽命普遍延長(zhǎng),骨質(zhì)疏松癥和各種原因?qū)е鹿钦鄣幕颊咭仓鹉暝龆唷?duì)于一些重大車禍、手術(shù)導(dǎo)致的骨折延遲愈合和骨折不愈合是困擾骨科醫(yī)生的一個(gè)重要課題。有研究表明老年骨折中骨質(zhì)疏松導(dǎo)致骨折的概率為69.4%。臨床上對(duì)骨質(zhì)疏松及骨折的治療大多是使用藥物和手術(shù)治療,雖然具有一定的療效,但是也帶來(lái)的很多副作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)適當(dāng)?shù)膽?yīng)力刺激可以促進(jìn)骨形成,但是不同的應(yīng)力刺激強(qiáng)度及頻率影響成骨的效果不同。近些年來(lái)有關(guān)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)持續(xù)與間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)（頻率32-37Hz,加速度0.2-0.3g）可以促進(jìn)骨的成長(zhǎng)、促進(jìn)骨折愈合,對(duì)抗骨質(zhì)疏松。我們課題組已經(jīng)在低載荷機(jī)械振動(dòng)促進(jìn)骨生長(zhǎng)、對(duì)抗骨質(zhì)疏松方面進(jìn)行了多年的研究,本課題主要是在間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)加載條件下,從Wnt/β-catenin信號(hào)通路、通路的特異性阻斷劑Dkk1、細(xì)胞骨架等方面對(duì)間歇低載荷振動(dòng)促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞成骨機(jī)制做出研究。為今后臨床工作中治療骨質(zhì)疏松及促進(jìn)骨折愈合提供一種新的治療思路和理論支持。實(shí)驗(yàn)方法:1、持續(xù)與間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)對(duì)MC3T3... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第1章 緒論
第2章 應(yīng)力刺激促進(jìn)骨質(zhì)疏松性骨折愈合研究進(jìn)展的綜述
    2.1 應(yīng)力刺激對(duì)骨質(zhì)疏松和骨折愈合的影響
        2.1.1 應(yīng)力刺激對(duì)抗骨質(zhì)疏松影響的研究
        2.1.2 應(yīng)力刺激對(duì)骨折愈合的影響
    2.2 應(yīng)力刺激對(duì)成骨細(xì)胞信號(hào)通路的影響
        2.2.1 鈣離子通路
    2.3 應(yīng)力刺激對(duì)成骨細(xì)胞細(xì)胞代謝和細(xì)胞因子的調(diào)控
        2.3.1 轉(zhuǎn)化生成因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)
        2.3.2 胰島素樣生長(zhǎng)因子I(Insulin-likeGrowthFactor-I,IGF-I)
        2.3.3 堿性磷酸酶(ALP)
    2.4 展望
第3章 持續(xù)與間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)經(jīng)典Wnt信號(hào)通路、Runx2因子的調(diào)控
    3.1 材料與方法
        3.1.1 細(xì)胞
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 相關(guān)試劑配置
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 MC3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 MC3T3-E1細(xì)胞的凍存
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)分組及振動(dòng)加載
        3.2.4 RT-qPCR檢測(cè)β-catenin、Runx2mRNA表達(dá)水平
        3.2.5 Western-blot檢測(cè)β-catenin蛋白水平變化
    3.3 統(tǒng)計(jì)方法
    3.4 結(jié)果
    3.5 討論
第4章 間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)作用下Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨效應(yīng)的調(diào)控
    4.1 材料與方法
        4.1.1 細(xì)胞
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 相關(guān)試劑配置
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 MC3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2.2 MC3T3-E1細(xì)胞的凍存
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)分組及振動(dòng)加載
        4.2.4 RT-qPCR檢測(cè)cyclinD1mRNA,β-cateninmRNA,COLⅠmRNA,OCNmRNA,Runx2mRNA的表達(dá)水平
        4.2.5 Western-blot法檢測(cè)各組COLⅠ蛋白、OCN蛋白、β-catenin蛋白、Runx2蛋白表達(dá)水平
        4.2.6 免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)β-catenin蛋白分布的影響
        4.2.7 激光共聚焦顯微鏡觀察間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞細(xì)胞骨架的影響
    4.3 統(tǒng)計(jì)方法
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)、DKK1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)基因的調(diào)控
        4.4.2 間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)、DKK1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨相關(guān)蛋白的調(diào)控
        4.4.3 間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)、DKK1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)β-catenin蛋白分布的影響
        4.4.4 間歇低載荷機(jī)械振動(dòng)對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞細(xì)胞骨架的影響
    4.5 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)校期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2在介導(dǎo)周期性牽張力對(duì)牙周膜細(xì)胞成骨分化中的作用[J]. 宋京,任大鵬,顏世果,藍(lán)菁,袁曉,郭慶圓,戚向敏.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(05)
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[3]動(dòng)載荷作用下骨重建力學(xué)調(diào)控機(jī)制[J]. 馬宗民,李淑嫻.  醫(yī)用生物力學(xué). 2015(04)
[4]張應(yīng)力刺激下Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)成牙骨質(zhì)細(xì)胞Runx2表達(dá)調(diào)控的體外研究[J]. 李書琴,楊珊,任嬡姝,戴紅衛(wèi).  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2015(01)
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[7]腺病毒介導(dǎo)的人骨形成蛋白2基因轉(zhuǎn)染促進(jìn)下頜牽張成骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳安威,魏奉才,王克濤,孫善珍,劉少華.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2007(01)
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[9]核心結(jié)合因子α1對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)的影響[J]. 董世武,應(yīng)大君,段小軍,朱楚洪,劉光久,糜建紅.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2005(09)
[10]機(jī)械張力對(duì)人成骨樣細(xì)胞TGF-β表達(dá)的影響[J]. 鄒淑娟,胡靜.  現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(03)

碩士論文
[1]機(jī)械應(yīng)力作用下促進(jìn)骨不連愈合的療效觀察[D]. 李尚志.山東大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3629249