目的:探討七氟醚預處理（SPC）減輕心肌細胞缺氧/復氧（H/R）損傷是否與激活信號通路HIF-1a/PDK-1,優(yōu)化H9C2大鼠心肌細胞無氧糖酵解有關。方法:H9C2心肌細胞用低糖培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后,隨機分成4組:（1）對照組（Con）;（2）缺氧/復氧組（H/R）;（3）七氟醚預處理組（SPC）;（4）七氟醚預處理組+HIF-1a抑制劑組（SPC+YC-1）;建立缺氧/復氧模型,在復氧3h后,檢測乳酸脫氫酶（LDH）、己糖激酶（HK）、6-磷酸果糖激酶-1（PFK-1）、丙酮酸激酶（PK）;檢測各組ATP產生量;流式檢測心肌細胞凋亡比例;熒光顯微鏡分析膜電位變化;Western Blot檢測HIF-1a、PDK-1、GAPDH及凋亡相關蛋白含量。結果:與缺氧/復氧組（H/R）相比,SPC組中調控糖酵解的關鍵酶（HK、PFK-1、PK）含量增加,產生ATP量增多,線粒體膜電位升高,細胞凋亡比率減少,HIF-1a、PDK-1、Bcl-2蛋白含量增加,Bax蛋白含量降低（P<0.05）;與七氟醚預處理組（SPC）相比,加入HIF-1a抑制劑（YC-1）后,糖酵解關鍵酶（HK、PFK-... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

細胞試驗示意圖

新疆醫(yī)科大學碩士學位論文12結果1H9C2大鼠心肌細胞的正常形態(tài)熒光倒置顯微鏡下觀察H9C2心肌細胞，完全貼壁，細胞形態(tài)呈現(xiàn)梭形。圖1a正常心肌細胞（10X）圖1b正常心肌細胞（20X）Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脫氫酶（LDH）水平及細胞活力檢測復氧3h末，各組間LDH水平比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細胞乳酸脫氫酶的水平顯著增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細胞LDH水平明顯降低（P<0.05），S+YC-1組細胞LDH水平差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細胞LDH水平升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。如圖2A復氧3h末，各組間細胞活性比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細胞活性顯著降低（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細胞活性增高，S+YC-1組細胞活性降低（P<0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細胞活性顯著降低，差異無統(tǒng)計學意義（P<0.05）。如圖2B

新疆醫(yī)科大學碩士學位論文12結果1H9C2大鼠心肌細胞的正常形態(tài)熒光倒置顯微鏡下觀察H9C2心肌細胞，完全貼壁，細胞形態(tài)呈現(xiàn)梭形。圖1a正常心肌細胞（10X）圖1b正常心肌細胞（20X）Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脫氫酶（LDH）水平及細胞活力檢測復氧3h末，各組間LDH水平比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細胞乳酸脫氫酶的水平顯著增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細胞LDH水平明顯降低（P<0.05），S+YC-1組細胞LDH水平差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細胞LDH水平升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。如圖2A復氧3h末，各組間細胞活性比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細胞活性顯著降低（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細胞活性增高，S+YC-1組細胞活性降低（P<0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細胞活性顯著降低，差異無統(tǒng)計學意義（P<0.05）。如圖2B

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3599822