目的:探討七氟醚預(yù)處理（SPC）減輕心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧（H/R）損傷是否與激活信號(hào)通路HIF-1a/PDK-1,優(yōu)化H9C2大鼠心肌細(xì)胞無氧糖酵解有關(guān)。方法:H9C2心肌細(xì)胞用低糖培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后,隨機(jī)分成4組:（1）對(duì)照組（Con）;（2）缺氧/復(fù)氧組（H/R）;（3）七氟醚預(yù)處理組（SPC）;（4）七氟醚預(yù)處理組+HIF-1a抑制劑組（SPC+YC-1）;建立缺氧/復(fù)氧模型,在復(fù)氧3h后,檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）、己糖激酶（HK）、6-磷酸果糖激酶-1（PFK-1）、丙酮酸激酶（PK）;檢測(cè)各組ATP產(chǎn)生量;流式檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡比例;熒光顯微鏡分析膜電位變化;Western Blot檢測(cè)HIF-1a、PDK-1、GAPDH及凋亡相關(guān)蛋白含量。結(jié)果:與缺氧/復(fù)氧組（H/R）相比,SPC組中調(diào)控糖酵解的關(guān)鍵酶（HK、PFK-1、PK）含量增加,產(chǎn)生ATP量增多,線粒體膜電位升高,細(xì)胞凋亡比率減少,HIF-1a、PDK-1、Bcl-2蛋白含量增加,Bax蛋白含量降低（P<0.05）;與七氟醚預(yù)處理組（SPC）相比,加入HIF-1a抑制劑（YC-1）后,糖酵解關(guān)鍵酶（HK、PFK-... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞試驗(yàn)示意圖

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12結(jié)果1H9C2大鼠心肌細(xì)胞的正常形態(tài)熒光倒置顯微鏡下觀察H9C2心肌細(xì)胞，完全貼壁，細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)梭形。圖1a正常心肌細(xì)胞（10X）圖1b正常心肌細(xì)胞（20X）Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脫氫酶（LDH）水平及細(xì)胞活力檢測(cè)復(fù)氧3h末，各組間LDH水平比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細(xì)胞乳酸脫氫酶的水平顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細(xì)胞LDH水平明顯降低（P<0.05），S+YC-1組細(xì)胞LDH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細(xì)胞LDH水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。如圖2A復(fù)氧3h末，各組間細(xì)胞活性比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細(xì)胞活性顯著降低（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細(xì)胞活性增高，S+YC-1組細(xì)胞活性降低（P<0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細(xì)胞活性顯著降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。如圖2B

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12結(jié)果1H9C2大鼠心肌細(xì)胞的正常形態(tài)熒光倒置顯微鏡下觀察H9C2心肌細(xì)胞，完全貼壁，細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)梭形。圖1a正常心肌細(xì)胞（10X）圖1b正常心肌細(xì)胞（20X）Fig1aNormalcardiomyocytes(10X)Fig1bNormalmyocardialcells(20X)2乳酸脫氫酶（LDH）水平及細(xì)胞活力檢測(cè)復(fù)氧3h末，各組間LDH水平比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細(xì)胞乳酸脫氫酶的水平顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細(xì)胞LDH水平明顯降低（P<0.05），S+YC-1組細(xì)胞LDH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細(xì)胞LDH水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。如圖2A復(fù)氧3h末，各組間細(xì)胞活性比較：與Con組相比，H/R組、SPC組、S+YC-1組細(xì)胞活性顯著降低（P<0.05）；與H/R組相比，SPC組細(xì)胞活性增高，S+YC-1組細(xì)胞活性降低（P<0.05）；與SPC組相比，S+YC-1組細(xì)胞活性顯著降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。如圖2B

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]七氟醚預(yù)處理對(duì)缺氧誘導(dǎo)因子1α表達(dá)和Slit2/Robo1信號(hào)通路的影響[J]. 孫文波,張立民,康立娜,吳春玲,黃冬冬,孫秀偉.  臨床麻醉學(xué)雜志. 2015(08)
[5]缺氧誘導(dǎo)因子1α對(duì)缺氧條件下大鼠心肌細(xì)胞糖酵解的影響[J]. 黨永明,黃躍生,周軍利,張家平,顏洪,張銘.  中華燒傷雜志. 2005(05)



本文編號(hào)：3599822