目的:探討核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（karyopherinα2,KPNA2）對(duì)人骨肉瘤（osteosarcoma,OS）增殖和血管生成的影響,并從分子層面分析其可能的作用機(jī)制。方法:（1）構(gòu)建Sh-KPNA2慢病毒載體及空載體Sh-Control轉(zhuǎn)染Saos-2細(xì)胞,觀察敲除KPNA2后對(duì)Saos-2細(xì)胞增殖的影響,用生長(zhǎng)曲線反應(yīng)KPNA2對(duì)Saos-2細(xì)胞的影響;（2）利用轉(zhuǎn)染Sh-KPNA2和空載體Sh-Control的Saos-2細(xì)胞分別構(gòu)建OS動(dòng)物模型,待裸鼠成瘤后比較兩組裸鼠瘤體的重量和體積;（3）裸鼠處死前,用小動(dòng)物活體熒光分子斷層成像系統(tǒng)（FMT）和瘤體的免疫組化驗(yàn)證KPNA2對(duì)瘤體血管生成的影響;（4）qRT-PCR和Western-bolt驗(yàn)證瘤體內(nèi)KPNA2和睪丸決定因子Y染色體性別決定區(qū)基因（SRY related HMG box-2,Sox2）的mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:（1）Sh-KPNA2組細(xì)胞增殖能力較Sh-Control組明顯降低（P<0.05）;（2）Sh-KPNA2組荷瘤小鼠瘤體體積和重量均小于Sh-Control組（P<0.05）;FMT掃描結(jié)果... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Saos一2細(xì)胞在轉(zhuǎn)染不同病毒后的變化(20Ox)

可以發(fā)現(xiàn)，收獲時(shí)，Sh-KPNA2

82.3 Sh-KPNA2 體內(nèi)抑制 OS 血管生成圖 4 顯示，對(duì) Angiosense750EX 掃描發(fā)現(xiàn) Sh-Control 組體內(nèi)的 OS 血管(17.47±1.75)明顯多于 Sh-KPNA2 組的血管生成（3.63±0.51）。且 Sh-Control 組管口徑和 Pecam-1 表達(dá)量都遠(yuǎn)高于 Sh-KPNA2 組（圖 5，6）。此結(jié)果顯示敲除 KP對(duì)腫瘤血管生成產(chǎn)生了強(qiáng)烈的抑制作用（P<0.05）。


本文編號(hào)：3592342