背景:急性脊髓損傷（ASCI）繼發(fā)的小膠質(zhì)細(xì)胞（MGs）的炎癥反應(yīng)是加重脊髓損傷的重要因素。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（Lnc RNA）轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄本1（MALAT1）被廣泛認(rèn)為與人類癌癥、血管疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)。近期研究表明,與MALAT1相關(guān)的miR-199b參與脊髓損傷后的炎癥反應(yīng)。本研究旨在探討MALAT1在急性脊髓損傷（ASCI）后小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用及相關(guān)機(jī)制研究。方法:通過(guò)Allen’s改良法建立成年大鼠的ASCI模型,通過(guò)BBB評(píng)分檢測(cè)大鼠行為學(xué)。LPS誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞建立炎性反應(yīng)模型,構(gòu)建慢病毒質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染敲除MALATA1 及 miR-199b。使用 Real-time PCR 測(cè)定大鼠和體外 ASCI 后 MALAT1和miR-199b的表達(dá)譜。運(yùn)用RNA pull-down及RIP方法來(lái)探討MALAT1與miR-199b之間的相互作用。通過(guò)Western blot檢測(cè)下游相關(guān)信號(hào)通路蛋白Iba-1,IKKβ,p-IκBα和p-p65表達(dá)。通過(guò)ELISA檢測(cè)炎性因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)。結(jié)果:研究結(jié)果提示,大鼠挫傷脊髓中MALAT1表達(dá)顯著增加（對(duì)照的2... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【圖文】：

大鼠急性脊髓損傷后MAL八Tl和n五R一199b的表達(dá)譜

我們假設(shè)ＭＡＬＡＴ１參與了?ＬＰＳ誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化和促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)??生。通過(guò)轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ－ＭＡＬＡＴｌ，在體外被ＬＰＳ活化的小膠質(zhì)細(xì)胞ＢＶ２和Ｎ９中抑??制ＭＡＬＡＴ１?（圖４．３Ａ）。我們發(fā)現(xiàn)ＭＡＬＡＴ１抑制降低了?ＬＰＳ誘導(dǎo)的Ｉｂａ－ｌ蛋白上??調(diào)，后者是活化小膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物（圖４．３Ａ）。此外，敲除ＭＡＬＡＴ１顯著降低??２４??

浙江大學(xué)碩上學(xué)位論文?實(shí)驗(yàn)結(jié)果??如圖４．４Ａ所示，呈現(xiàn)在ｍｉＲ－１９９ｂ中，表明ＭＡＬＡＴ１和ｍｉＲ－１９９ｂ之間可能的相??互作用。進(jìn)行ＲＩＰ測(cè)定，我們發(fā)現(xiàn)ＭＡＬＡＴ１和ｍｉＲ－１９９ｂ都存在于Ａｇｏ２蛋白復(fù)合??物中（圖４．４Ｂ）。ＲＮＡ?ｐｕ丨１－ｄｏｗｎ顯示生物素化的ＭＡＬＡＴ１拉下的復(fù)合物中富含??Ａｇｏ２?蛋白和?ｍｉＲ－１９９ｂ?（圖?４．４，Ｃ?和?Ｄ）。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Multifunctional biomimetic spinal cord: New approach to repair spinal cord injuries[J]. Yang Liu,Qian Li,Bin Zhang,De-Xiang Ban,Shi-Qing Feng.  World Journal of Experimental Medicine. 2017(03)



本文編號(hào)：3576946