目的:通過體內(nèi)體外兩種實(shí)驗(yàn)途徑,初步評價納米級5-FU醇脂體懸液（5-FU Ethosomal Suspension,5-FU ES）對于大鼠坐骨神經(jīng)離斷損傷模型中神經(jīng)斷端瘢痕組織增生的抑制效果。方法:借助透射電子顯微鏡（TEM）,觀察制得的納米級5-FU醇脂體的大小及形態(tài),再通過激光粒度儀（PCS）測其平均粒徑和分散系數(shù);體外實(shí)驗(yàn)在原代神經(jīng)成纖維細(xì)胞與背根神經(jīng)元細(xì)胞（Dorsal Root Ganglion,DRG）混合培養(yǎng)體系中,篩選適合周圍神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞生長的納米級5-FU醇脂體懸液的適合濃度及培養(yǎng)時間;借助Western blot及Realtime PCR技術(shù),分別測定不同濃度納米級5-FU醇脂體懸液對混合體系中周圍神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞分泌I型膠原蛋白表達(dá)的影響和核酸水平的變化;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠坐骨神經(jīng)離斷損傷模型,經(jīng)蘇木精-伊紅染色法（Hematoxylin-Eosin staining,HE）觀察不同實(shí)驗(yàn)組（正常對照組Normal;0.9%生理鹽水組NS;單純縫合神經(jīng)外膜組Transaction;0.03%（w/v）納米級5-FU醇脂體組5-FU ES）周圍神經(jīng)斷端吻... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

納米級5-FUES在透射電鏡下的形態(tài)

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文17胞的抑制效應(yīng)忽略，認(rèn)為5-FU只對神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞起作用。1基于MTT實(shí)驗(yàn)的多因素方差分析通過MTT實(shí)驗(yàn)（包括5-FU醇脂體懸液與納米級5-FU醇脂體懸液）所得的OD值，我們對實(shí)驗(yàn)分組、選擇藥物濃度和培養(yǎng)時間的這幾個變量進(jìn)行多因素方差分析，來確定實(shí)驗(yàn)分組及變量的選擇是否合理（表1）。表1多因素方差分析結(jié)果（分組/濃度/時間）Table1Multivariateanalysisofvariance(team/concentration/time)變異源均方FP分組2.492356.4910.000濃度0.52675.3160.000時間0.69499.2710.000分組*濃度0.12317.6090.000分組*時間0.20429.2000.000濃度*時間0.0213.0030.002分組*濃度*時點(diǎn)0.0395.5630.000表1分析結(jié)果表明，各因素以及各因素之間的交互作用都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。也就是說，在本實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)分組、藥物濃度和培養(yǎng)時間對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果來說都是有差別的，我們可以通過這些變量的差異來具體設(shè)計(jì)和分析實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。2所有變量的OD值比較用于篩選合適實(shí)驗(yàn)組圖2納米級5-FU醇脂體與5-FU醇脂體不同時間不同濃度的吸光度比較

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文18Fig2Thedifferencebetweentheethosomalcarriedwithnanoscale5-FUESand5-FUESbytheODvalue圖2將不同組別（5-FU醇脂體懸液與納米級5-FU醇脂體懸液）、不同時間（24h、48h、72h、96h）不同濃度（0.01%、0.02%、0.03%、0.04%，w/v）樣本的吸光度值都在一張圖上顯示出來，通過該圖可以非常直觀地看出，在相同濃度相同培養(yǎng)時間條件下，納米級5-FU醇脂體的OD值均低于5-FU醇脂體。3藥物濃度變化對于神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞的影響圖3不同濃度納米級5-FU醇脂體對神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞的影響Fig3Effectsofdifferentconcentrationsofnanoscale5-FUESonneuralscarfibroblasts*P<0.05vs0.01%w/v圖3為不同濃度納米級5-FU醇脂體對神經(jīng)瘢痕成纖維細(xì)胞存活率和抑制率的比較，從圖上可以看出，隨著納米級5-FU醇脂體濃度的增加，成纖維細(xì)胞的存活率越來越低，抑制率不斷增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)當(dāng)納米級5-FU醇脂體濃度為0.01%時，與其他各個濃度的存活率都存在差異（P<0.05），當(dāng)納米級5-FU醇脂體濃度為0.02%時，與0.03%濃度的存活率也存在差異（P<0.05），而當(dāng)納米級5-FU醇脂體濃度為0.03%時，與0.04%濃度的存活率就沒有顯著差異了（P=0.0768），比較抑制率可以得到相同的結(jié)果，當(dāng)納米級5-FU醇脂體濃度為0.01%時，與其

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本文編號：3541337