利用外源性或內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cell,NSCs）來進(jìn)行脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）修復(fù)一直是一項(xiàng)世界級難題,這主要是因?yàn)樘幱趽p傷部位復(fù)雜微環(huán)境的神經(jīng)干細(xì)胞傾向于分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞而不是神經(jīng)元,分化的星形膠質(zhì)細(xì)胞及其分泌物還可進(jìn)一步形成膠質(zhì)瘢痕,構(gòu)成神經(jīng)再生的物理和化學(xué)屏障。雖然目前已有多種策略可在損傷區(qū)域?qū)崿F(xiàn)神經(jīng)元的定向分化,但采用超微粒徑陽離子碳量子點(diǎn)（cationic carbon quantum dots,CQDs）誘導(dǎo)NSCs定向分化為神經(jīng)元,以此來促進(jìn)脊髓損傷修復(fù)的研究尚未見報(bào)道。本課題首次研究了陽離子碳量子點(diǎn)除了依賴于其光學(xué)性質(zhì)（如生物標(biāo)記和生物成像等）和陽離子性質(zhì)（如基因治療和藥物輸送等）外對細(xì)胞分化命運(yùn)的影響。本研究以枸杞寡糖（Lycium barbarum L.oligosaccharide,LBOS）為碳源,乙二胺和PEI為陽離子試劑,通過一步水熱合成法制備出了超微粒徑的陽離子碳量子點(diǎn)（¹nm）。體外實(shí)驗(yàn)表明,超微粒徑的陽離子碳量子點(diǎn)可顯著抑制NSCs向星形膠質(zhì)細(xì)胞分化,并在不影響神經(jīng)元分化... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

（A）枸杞寡糖的高效凝膠滲透色譜圖；（B）Bradford法的蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線；（C）枸杞寡糖的質(zhì)譜圖

超微粒徑陽離子碳量子點(diǎn)介導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞定向分化神經(jīng)元及體內(nèi)脊髓損傷修復(fù)研究20圖2.2使用HPLC法測定枸杞寡糖的單糖組成：(1)D-甘露糖；(2)L-鼠李糖；(3)D-葡萄糖醛酸；(4)乳糖；(5)D-半乳糖；(6)L-阿拉伯糖；(7)D-木糖；(8)L-海藻糖Fig2.2TheHPLCspectraofMonosaccharidecompositionofLBOS.Peaks:(1)D-mannose;(2)L-rhamnose;(3)D-Galacturonicacid;(4)lactose;(5)D-galactose;(6)L-arabinose;(7)D-xylose;(8)L-fucose2.4本章小結(jié)經(jīng)過水提醇沉法、Seveg法、柱層析法從中藥枸杞果實(shí)中提純出枸杞寡糖。Bradford法測得寡糖中殘余蛋白含量為0.14%，表明精制寡糖中幾乎不含雜蛋白；高效凝膠滲透色譜測得的HPGPC譜圖中僅存在一個(gè)正態(tài)分布良好的鐘形峰，表明精制枸杞寡糖分子量分布集中且無小分子雜質(zhì)存在；離子阱質(zhì)譜測得寡糖的分子量為862，表明枸杞寡糖中的單糖個(gè)數(shù)約為5個(gè)，結(jié)合單糖組成結(jié)果進(jìn)一步證明這5個(gè)單糖均為D-半乳糖。

江蘇大學(xué)碩士論文25拍攝EGFP游離質(zhì)粒和CQDs/DNA納米粒的遷移情況。3.3結(jié)果與討論3.3.1碳量子點(diǎn)的純度分析經(jīng)過減壓濃縮和透析，制備的碳量子點(diǎn)理論上不存在游離的反應(yīng)物（乙二胺可隨水蒸氣揮發(fā)；PEI和枸杞寡糖的分子量分別為1200和862；使用截留量為300Da的透析袋并收集透析外液）。為了證實(shí)這一觀點(diǎn)，通過核磁共振氫譜來比較反應(yīng)產(chǎn)物碳量子點(diǎn)與三種反應(yīng)物的化學(xué)位移，進(jìn)而確定產(chǎn)物碳量子點(diǎn)中反應(yīng)物是否殘留，結(jié)果如圖3.1所示。圖3.1（A）乙二胺的1H-NMR譜圖；（B）枸杞寡糖的1H-NMR譜圖；（C）PEI的1H-NMR譜圖；（D）未透析碳量子點(diǎn)的1H-NMR譜圖；（E）透析碳量子點(diǎn)的1H-NMR譜圖；（F）透析外液中碳量子點(diǎn)在紫外燈下的熒光Fig3.11H-NMRspectraofethylenediamine(A),theLBOS(B),PEI(C),theundialyzedCQDs(D)andthedialyzedCQDs(E).(F)showedthefluorescenceofexternaldialysateundera365nmUVlampexcitation由圖3.1可看出，枸杞寡糖的化學(xué)位移集中在δ3.1-4.0ppm，PEI和乙二胺的化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]繼發(fā)性脊髓損傷微環(huán)境的研究進(jìn)展[J]. 張盼,趙紅衛(wèi),盧斌,彭龍.  海南醫(yī)學(xué). 2018(19)
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本文編號：3534372