背景與目的ZIC1基因和Survivin基因分別被認(rèn)為是一個潛在的抑癌基因和促癌基因,并在乳腺惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到了重要的作用。本研究旨在進一步確認(rèn)ZIC1基因在乳腺癌中的作用,分析ZIC1基因與Survivin基因在乳腺癌中的表達水平相關(guān)性,并探索與ZIC1基因相關(guān)的分子機制。方法（1）收集120例在2014年-2015年間于上海長海醫(yī)院行乳腺癌根治術(shù)的浸潤性乳腺癌患者,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測乳腺癌組織及對應(yīng)的癌旁組織中ZIC1蛋白和Survivin蛋白的表達水平,并分析癌組織中兩種表達的相關(guān)性;（2）選取六種人乳腺癌細(xì)胞株（MCF-7,MDA-MB-231,MDA-MB-453,SK-BR3,BT-474和BT-549）,和一種人正常乳腺上皮細(xì)胞株MCF-10A,常規(guī)培養(yǎng)后,提取總蛋白,進行western blotting技術(shù)檢測ZIC1蛋白與Survivin蛋白的表達情況,并篩選合適的乳腺癌細(xì)胞株用于后續(xù)實驗;（3）應(yīng)用r LV-Zs Green-PGK-Puro和r LV-Zic1-PGK-Puro慢病毒顆粒進行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,嘌呤霉素篩選細(xì)胞后,穩(wěn)定培養(yǎng),并應(yīng)用熒光顯微鏡及... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

0例浸潤性乳腺癌組織及癌旁組織中ZIC1及Surivivn表達情況（×400）

ZIC1 基因過表達可通過下調(diào) Survivin 基（MCF-10A）和六種人乳腺癌細(xì)胞株（MCSK-BR3, BT-474 and BT-549）內(nèi) ZIC1 蛋白與中可見，六種乳腺癌細(xì)胞株內(nèi) ZIC1 蛋白表達皮細(xì)胞內(nèi)的表達；然而，六種乳腺癌細(xì)胞株MCF-10A 乳腺正常上皮細(xì)胞內(nèi)的表達。另外，和 SK-BR3 這兩株乳腺癌細(xì)胞株內(nèi)，其平均 Z腺癌細(xì)胞較低，為了在之后的細(xì)胞轉(zhuǎn)染以及體果，我們選擇該兩株細(xì)胞株為研究對象，進行乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的檢測。

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文blotting 技術(shù)檢測比較“Vector”組與“ZIC1”組兩種細(xì)胞內(nèi) ZIC1 蛋白的差異（圖 3B 和圖 3C）：穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒MDA-MB-231 和 SK-BR3 細(xì)胞內(nèi)，ZIC1 蛋白水平明顯升高，說明慢病果較好，轉(zhuǎn)染成功。不僅如此，我們還發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 rLV-Zic1-PGK毒顆粒后的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 細(xì)胞內(nèi)，Survivin 蛋白表達水平這意味著，乳腺癌細(xì)胞中 ZIC1 蛋白過表達后，Survivin 蛋白受到明顯用。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3503055