為了探討IL-6（interleukin-6,IL-6）/STAT3（signal transducer and activator of transcription3,STAT3）信號通路對骨肉瘤細胞增殖和遷移的作用,該研究采用ELISA檢測人臍帶間充質(zhì)干細胞（human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs）和Saos-2細胞白介素-6的表達量。Western blot檢測Saos-2細胞STAT3、p-STAT3蛋白質(zhì)的表達水平。RT-PCR檢測PCNA、Cyclin D1、Survivin、STAT3基因的轉(zhuǎn)錄水平。細胞計數(shù)法和CCK-8法檢測Saos-2細胞的增殖能力。劃痕實驗和Transwell實驗檢測Saos-2細胞的遷移能力。結(jié)果顯示,h UC-MSCs IL-6表達量明顯高于Saos-2細胞;h UC-MSCs的條件培養(yǎng)基（conditioned medium,CM）和IL-6均能激活STAT3,IL-6中和抗體則明顯削弱了h UC-MSCs-CM的激活作用;用IL-6中和抗體或AG490抑制S... 

【文章來源】：中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2016,38(01)CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 標本來源
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 方法
        1.3.1 h UC-MSCs的分離培養(yǎng)及鑒定
        1.3.2 h UC-MSCs條件培養(yǎng)基(conditioned medium CM)的制備
        1.3.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)
        1.3.4總RNA提取及RT-PCR
        1.3.5 Western blot檢測STAT3磷酸化水平
        1.3.6細胞計數(shù)法和CCK-8法檢測各組細胞增殖情況
        1.3.7 Transwell遷移實驗
        1.3.8劃痕實驗
    1.4 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 h UC-MSCs的生物學(xué)特性
    2.2 IL-6和h UC-MSCs-CM對Saos-2細胞STAT3和p-STAT3蛋白質(zhì)表達的影響
    2.3 IL-6和STAT3對Saos-2細胞增殖相關(guān)基因表達的影響
    2.4 IL-6和STAT3對Saos-2細胞增殖的影響
    2.5 IL-6和STAT3對Saos-2細胞遷移的影響
3 討論



本文編號：3447712