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體外沖擊波干預(yù)兔股骨頭缺血壞死實驗研究

發(fā)布時間:2017-05-02 17:20

  本文關(guān)鍵詞:體外沖擊波干預(yù)兔股骨頭缺血壞死實驗研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討以高能量的體外沖擊波(Extracorporeal shock wave,簡稱ESW)模擬微創(chuàng)傷因素干預(yù)兔股骨頭缺血壞死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)病程的實驗方法與初步效果。材料與方法2.5~3月齡SPF雄性新西蘭大白兔30只,隨機分為A、B、C三組,每組10只。A、B、C組分別以激素聯(lián)合脂多糖、激素聯(lián)合ESW、激素聯(lián)合脂多糖及ESW為干預(yù)措施。其中,ESW沖擊的靶點為左側(cè)股骨頭區(qū)域,能量均為14W、1000次,于實驗第48h實施,僅1次;激素(醋酸潑尼松龍,20mg/kg,3次)給注的部位為臀肌,分別于實驗第24h、72h、96h肌注;脂多糖(2.0μg/kg,1次)給注途徑為耳緣靜脈,于實驗第48h實施。實驗期間每間隔24 h肌肉或腹腔注射青霉素鈉(5.0 mg/kg)、阿米卡星(1.63×104U/kg)1次,持續(xù)14天。實驗全程觀察記錄兔生存狀況并評分,第4天行股骨頭MRI(Magnetic Resonance Imaging,MRI)掃描,最后于第3周前后行第二次MRI掃描、凝血功能檢測、生理鹽水血管灌注后磁共振胰膽管造影(Magnetic Resonance Cholangiopancreatography,MRCP)序列掃描、碘水灌注后CT血管造影(CT angiography,CTA)檢查、微型計算機斷層成像(Micro computed tomography,Micro CT)骨分析、以及股骨頭蘇木精—伊紅染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)病理學(xué)觀察。行前后2次MRI影像的對比觀察,匯總兔生存狀況、凝血功能、局部血供情況、骨微細結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)等信息,以HE染色病理學(xué)結(jié)果為金標準,分析高能量ESW干預(yù)兔ONFH病程的效果,總結(jié)實驗方法的優(yōu)點與不足。結(jié)果實驗期間A、B、C組各死亡2只、3只和2只兔。其余23只兔于第16天至29天(中位時間20.5天)結(jié)束實驗。實驗技術(shù)方面遇到的主要問題,一是由于兔體型小,碎石機水囊接觸部位需選擇右臀,此時水囊與沖擊靶點(左股骨頭)的間距較遠,二是mrcp檢查時難以維持血管內(nèi)生理鹽水的適度充盈。實驗觀察指標的主要結(jié)果如下:(1)三組兔的生存狀況總體變化趨勢一致,均于第3天發(fā)生惡化,第10天開始恢復(fù),但c組的總體情況不及a、b組。(2)凝血4項指標中,多只兔部分凝血活酶時間(activatedpartialthromboplastintime,atpp)未檢出,a、c組凝血酶時間(thrombintime,pt)值稍短,c組纖維蛋白原(humanfibrinogen,fib)稍長。(3)圖像質(zhì)量符合要求的22只兔2次mri檢查對比,t1wi冠狀位均未發(fā)現(xiàn)信號異常改變,t2wi(脂肪抑制)共檢出6只(27.27%,6/22)兔股骨頭信號異常改變,其中,a、b、c組各見1、2、3只,均表現(xiàn)為雙側(cè)股骨頭信號的一致性增高或降低,并關(guān)節(jié)腔積液。(4)mrcp、cta顯示髂總動脈、髂外動脈的成功率均為100%;顯示髂內(nèi)動脈的比率分別為100%(21/21)、95.24%,顯示髂腰動脈的比率分別為30.43%、73.91%。cta對旋股內(nèi)側(cè)動脈和旋股外側(cè)動脈的總體顯示率分別為52.38%、78.57%,而mrcp均未能顯示。(5)micoct顯示c組左側(cè)股骨頭骨小梁分離度(trabecularseparation,tb.sp)小于a組、高于b組,骨小梁厚度(trrabecularthickness,tb.th)低于a組、近于b組,骨礦物質(zhì)密度(bonemineraldensity,bmd)高于a組、近于b組,其中a、b組間tb.sp、tb.th的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(6)a、b、c三組兔股骨頭骨壞死發(fā)生率分別為87.50%(7/8)、57.14%(4/7)、62.50%(5/8)。a組有1例(1側(cè))未發(fā)生壞死,b組有3例(4側(cè))未發(fā)生壞死,c組有3例(5側(cè))未發(fā)生壞死。結(jié)論(1)臨床所用esw碎石機可用于兔股骨頭沖擊波干預(yù)實驗并產(chǎn)生效應(yīng),但可作為靶點的股骨頭所在側(cè)軀體無法貼近水囊,esw傳導(dǎo)路徑較遠且需途徑對側(cè)髖部,沖擊過程中靶點位置的控制也有一定的難度。這可能是實驗組左、右側(cè)兩側(cè)股骨頭部分觀察指標雖然存在差異,但差異并不顯著的主要原因。(2)實驗所用的觀察技術(shù)可以較好地反映實驗動物全身或局部變化狀況,其中,microct技術(shù)檢測的股骨頭骨微細結(jié)構(gòu)改變較為敏感,實驗嘗試的mrcp技術(shù)用于相關(guān)血管顯示的效果不及cta,但其對液體檢測更加敏感,如能解決血管內(nèi)鹽水充盈不足的問題,其顯示血管的價值可能會顯著提升。(3)實驗所用14w ESW沖擊ONFH兔股骨頭后所產(chǎn)生的效應(yīng)以骨損傷及損傷后修復(fù)功能的增強為主,其骨壞死的發(fā)生率有所下降而非增高。但是,這種改變不僅發(fā)生在沖擊靶側(cè)股骨頭,也發(fā)生于非靶側(cè)股骨頭,該現(xiàn)象可能與前述的ESW操作存在的難題有關(guān),也可能緣于ESW與激素或內(nèi)毒素之間的交互作用,其具體原因尚不明確。(4)實驗所用14w ESW沖擊ONFH兔股骨頭后,兔凝血功能狀況所受影響較大,主要表現(xiàn)為對脂多糖所致高凝血狀態(tài)的緩解作用。該效應(yīng)與兔生存狀況評分表現(xiàn),以及前述ESW沖擊側(cè)和非沖擊側(cè)股骨頭變化缺乏顯著差異性的現(xiàn)象可能有關(guān)聯(lián),但具體的機制尚待深入研究。
【關(guān)鍵詞】:股骨頭缺血壞死 體外沖擊波 激素 脂多糖 醫(yī)學(xué)成像技術(shù)
【學(xué)位授予單位】:成都醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R681.8
【目錄】:
  • 摘要5-8
  • Abstract8-11
  • 前言11-14
  • 1 材料與方法14-22
  • 1.1 實驗動物14
  • 1.2 實驗儀器14
  • 1.3 試劑與耗材14-15
  • 1.4 兔ONFH模型的建立及ESW干預(yù)的方法15-17
  • 1.5 生存狀況觀察方法17
  • 1.6 凝血功能檢測方法17
  • 1.7 MRI掃描技術(shù)17-18
  • 1.8 血管顯像技術(shù)18-19
  • 1.9 Micor CT掃描技術(shù)19-20
  • 1.10 HE染色技術(shù)20
  • 1.11 影像學(xué)圖像分析方法20-21
  • 1.12 HE染色切片觀察方法21
  • 1.13 統(tǒng)計學(xué)分析21-22
  • 2 實驗結(jié)果22-40
  • 2.1 兔生存狀況22-24
  • 2.2 凝血功能檢測結(jié)果24-25
  • 2.3 MRI觀察25-29
  • 2.4 血管觀察結(jié)果29-33
  • 2.5 Micor CT觀測結(jié)果33-36
  • 2.6 HE染色觀察結(jié)果36-40
  • 3 討論40-46
  • 3.1 實驗技術(shù)與方法40-41
  • 3.2 實驗結(jié)果與分析41-45
  • 3.3 實驗的不足與思考45-46
  • 4 結(jié)論46-47
  • 參考文獻47-51
  • 文獻綜述51-62
  • 參考文獻58-62
  • 附錄62-64
  • 成果64-65
  • 致謝65

【參考文獻】

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本文編號:341390

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