片仔癀通過PI3K/Akt通路抑制人骨肉瘤耐藥細(xì)胞MG63/ADM增殖的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-24 19:39
目的本課題以前期采用阿霉素大劑量間隙干預(yù)的方法成功建立的骨肉瘤阿霉素耐藥株MG63/ADM細(xì)胞為研究對(duì)象,觀察PTEN、p-Akt、Akt在MG63/ADM細(xì)胞中的表達(dá),通過體外實(shí)驗(yàn)觀察片仔癀對(duì)骨肉瘤MG63/ADM細(xì)胞增殖、凋亡的作用,及對(duì)PTEN、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved-PARP蛋白表達(dá)的影響,進(jìn)而深入剖析片仔癀對(duì)骨肉瘤耐藥細(xì)胞增殖抑制作用與PI3K/Akt信號(hào)通路的關(guān)系,進(jìn)一步為臨床治療骨肉瘤提供理論基礎(chǔ)。方法:1、PTEN、Akt、p-Akt蛋白在MG63/ADM細(xì)胞中的表達(dá)。以成功建立的骨肉瘤阿霉素耐藥株MG63/ADM細(xì)胞為研究對(duì)象,采用Western blot方法檢測(cè)PTEN、Akt、p-Akt蛋白在MG63/ADM細(xì)胞中的表達(dá)情況。2、片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞的作用及對(duì)PI3K/Akt通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。采用MTT法檢測(cè)不同濃度、不同作用時(shí)間的片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞增殖的影響;Hoechst 33342染色熒光顯微鏡下觀察片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞凋亡的影響;Western blot法觀察片仔癀作用后MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、...
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞
前言
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 細(xì)胞株
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
1.4 主要試劑配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 骨肉瘤耐藥細(xì)胞MG63/ADM體外培養(yǎng)
2.2 片仔癀藥液的制備
2.3 Western blot檢測(cè)MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt蛋白的表達(dá)情況
2.4 MTT檢測(cè)片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞增殖抑制率的影響
2.5 Hoechst33342染色檢測(cè)MG63/ADM細(xì)胞凋亡
2.6 Western blot檢測(cè)PTEN、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved-PARP蛋白表達(dá)情況
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.8 技術(shù)路線圖
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 觀察記錄MG63/ADM細(xì)胞生長(zhǎng)情況
3.2 MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt蛋白的表達(dá)情況
3.3 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞增殖的影響
3.4 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞凋亡的影響
3.5 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved-PARP蛋白表達(dá)的影響
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白花蛇舌草對(duì)Renca腎癌細(xì)胞模型小鼠凋亡相關(guān)蛋白Fas、caspase3及caspase7表達(dá)影響[J]. 周進(jìn),趙朋. 中國(guó)生化藥物雜志. 2016(12)
[2]片仔癀通過PI3K/Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)人骨肉瘤U2OS細(xì)胞凋亡[J]. 林海英,劉俊寧,陳炳藝,李楠,張燕. 云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]骨肉瘤中醫(yī)證型與方藥分析研究[J]. 司富春,丁帥偉. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(07)
[4]片仔癀與阿霉素聯(lián)用對(duì)骨肉瘤耐藥細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 張燕,王琪鴻,牛素生,劉俊寧,張俐. 中華中醫(yī)藥雜志. 2015(03)
[5]腫瘤干細(xì)胞與腫瘤血管異質(zhì)性[J]. 劉志勇,孫保存. 中國(guó)腫瘤臨床. 2014(02)
[6]片仔癀對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞U2OS細(xì)胞周期的影響[J]. 張燕,王琪鴻,張俐,牛素生,劉宇. 江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(05)
[7]中醫(yī)藥聯(lián)合化療對(duì)大腸癌Ⅱ、Ⅲ期患者生存期的影響[J]. 呂仙梅,鄭堅(jiān),朱瑩杰,顧纓. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2012(09)
[8]骨肉瘤干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[J]. 李力韜,郭喬楠. 西部醫(yī)學(xué). 2012(05)
[9]LY294002抑制PI3K/Akt通路對(duì)人骨肉瘤類腫瘤干細(xì)胞增殖的影響[J]. 宮晨,郭風(fēng)勁,秦亮,祁軍,尹德龍,姚斌. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2011 (12)
[10]PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與卵巢癌順鉑耐藥相關(guān)性的研究[J]. 張棟,孔德璇,和珍珍,瞿全新. 天津醫(yī)藥. 2011(04)
博士論文
[1]青藤堿通過ROS誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致骨肉瘤凋亡并抑制骨肉瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移[D]. 謝濤.浙江大學(xué) 2016
[2]片仔癀對(duì)人骨肉瘤阿霉素耐藥細(xì)胞的作用及機(jī)制探討[D]. 張燕.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[3]平肺復(fù)方對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的增殖抑制及作用機(jī)制[D]. 王玥姣.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[4]中藥復(fù)方聯(lián)合他莫昔芬對(duì)MCF-7乳腺癌的抑瘤作用及其機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 周躍華.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2012
碩士論文
[1]片仔癀干預(yù)骨肉瘤干細(xì)胞ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白逆轉(zhuǎn)耐藥的機(jī)制研究[D]. 林海英.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]FASN和PI3K/Akt反饋調(diào)節(jié)信號(hào)通路在骨肉瘤細(xì)胞U2-OS惡性表型中的研究[D]. 王恒.南昌大學(xué) 2014
[3]片仔癀逆轉(zhuǎn)大腸癌多藥耐藥的作用機(jī)制研究[D]. 沈阿靈.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[4]miR-129促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞多西紫杉醇耐藥的探索性研究[D]. 張媛.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3408330
【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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中文摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞
前言
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 細(xì)胞株
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
1.4 主要試劑配制
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 骨肉瘤耐藥細(xì)胞MG63/ADM體外培養(yǎng)
2.2 片仔癀藥液的制備
2.3 Western blot檢測(cè)MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt蛋白的表達(dá)情況
2.4 MTT檢測(cè)片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞增殖抑制率的影響
2.5 Hoechst33342染色檢測(cè)MG63/ADM細(xì)胞凋亡
2.6 Western blot檢測(cè)PTEN、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved-PARP蛋白表達(dá)情況
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.8 技術(shù)路線圖
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 觀察記錄MG63/ADM細(xì)胞生長(zhǎng)情況
3.2 MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt蛋白的表達(dá)情況
3.3 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞增殖的影響
3.4 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞凋亡的影響
3.5 片仔癀對(duì)MG63/ADM細(xì)胞中PTEN、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved-PARP蛋白表達(dá)的影響
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白花蛇舌草對(duì)Renca腎癌細(xì)胞模型小鼠凋亡相關(guān)蛋白Fas、caspase3及caspase7表達(dá)影響[J]. 周進(jìn),趙朋. 中國(guó)生化藥物雜志. 2016(12)
[2]片仔癀通過PI3K/Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)人骨肉瘤U2OS細(xì)胞凋亡[J]. 林海英,劉俊寧,陳炳藝,李楠,張燕. 云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]骨肉瘤中醫(yī)證型與方藥分析研究[J]. 司富春,丁帥偉. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(07)
[4]片仔癀與阿霉素聯(lián)用對(duì)骨肉瘤耐藥細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 張燕,王琪鴻,牛素生,劉俊寧,張俐. 中華中醫(yī)藥雜志. 2015(03)
[5]腫瘤干細(xì)胞與腫瘤血管異質(zhì)性[J]. 劉志勇,孫保存. 中國(guó)腫瘤臨床. 2014(02)
[6]片仔癀對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞U2OS細(xì)胞周期的影響[J]. 張燕,王琪鴻,張俐,牛素生,劉宇. 江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(05)
[7]中醫(yī)藥聯(lián)合化療對(duì)大腸癌Ⅱ、Ⅲ期患者生存期的影響[J]. 呂仙梅,鄭堅(jiān),朱瑩杰,顧纓. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2012(09)
[8]骨肉瘤干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[J]. 李力韜,郭喬楠. 西部醫(yī)學(xué). 2012(05)
[9]LY294002抑制PI3K/Akt通路對(duì)人骨肉瘤類腫瘤干細(xì)胞增殖的影響[J]. 宮晨,郭風(fēng)勁,秦亮,祁軍,尹德龍,姚斌. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2011 (12)
[10]PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與卵巢癌順鉑耐藥相關(guān)性的研究[J]. 張棟,孔德璇,和珍珍,瞿全新. 天津醫(yī)藥. 2011(04)
博士論文
[1]青藤堿通過ROS誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致骨肉瘤凋亡并抑制骨肉瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移[D]. 謝濤.浙江大學(xué) 2016
[2]片仔癀對(duì)人骨肉瘤阿霉素耐藥細(xì)胞的作用及機(jī)制探討[D]. 張燕.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[3]平肺復(fù)方對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的增殖抑制及作用機(jī)制[D]. 王玥姣.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[4]中藥復(fù)方聯(lián)合他莫昔芬對(duì)MCF-7乳腺癌的抑瘤作用及其機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 周躍華.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2012
碩士論文
[1]片仔癀干預(yù)骨肉瘤干細(xì)胞ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白逆轉(zhuǎn)耐藥的機(jī)制研究[D]. 林海英.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]FASN和PI3K/Akt反饋調(diào)節(jié)信號(hào)通路在骨肉瘤細(xì)胞U2-OS惡性表型中的研究[D]. 王恒.南昌大學(xué) 2014
[3]片仔癀逆轉(zhuǎn)大腸癌多藥耐藥的作用機(jī)制研究[D]. 沈阿靈.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[4]miR-129促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞多西紫杉醇耐藥的探索性研究[D]. 張媛.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3408330
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