SIRT1對BMP2誘導(dǎo)干細(xì)胞成軟骨分化及軟骨穩(wěn)態(tài)維持的協(xié)同作用及機(jī)制研究
發(fā)布時間:2021-08-24 01:07
目的:探討沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(silent information regulator 2 related enzyme 1,SIRT1)對骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)誘導(dǎo)干細(xì)胞成軟骨分化以及在氧化應(yīng)激下對軟骨表型的影響。方法:構(gòu)建腺病毒Ad-SIRT1、Ad-BMP2并通過Western blot實驗和Real-time PCR實驗驗證SIRT1、BMP2表達(dá)情況。探討SIRT1是否具有促進(jìn)BMP2誘導(dǎo)干細(xì)胞成軟骨分化作用,分為了Ad-GFP組、Ad-SIRT1組、Ad-BMP2組和Ad-BMP2+Ad-SIRT1組,通過Real-time PCR、Western blot檢測各組成軟骨分化指標(biāo)Sox9、Col2A1、Aggrecan等的表達(dá)情況,Real-time PCR檢測了Col2A1和Aggrecan表達(dá),并通過Alcian blue染色檢測各組在不同時間點軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的分泌情況。此外還進(jìn)行干細(xì)胞裸鼠皮下移植實驗,分為Ad-GFP組、Ad-SIRT1組、Ad-BMP2組和Ad-BMP2+Ad-SIRT1組不同...
【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
腺病毒Ad-GFP,Ad-SIRT1以及Ad-BMP2感染C3H10細(xì)胞后在白光以及熒光顯微鏡下觀察其形態(tài)(100X)
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文22圖2Real-timePCR驗證SIRT1(A)和BMP2(B)過表達(dá)情況。*:p<0.05Fig.2ThemRNAexpressionofSIRT1andBMP2wasmeasuredusingreal-timePCR.*:p<0.05圖3Westernblot驗證腺病毒SIRT1過表達(dá)Fig.3TheexpressionofSIRT1wasmeasuredusingWesternblot.圖4Westernblot驗證腺病毒BMP2過表達(dá)Fig.4TheexpressionofBMP2wasmeasuredusingWesternblot.
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文22圖2Real-timePCR驗證SIRT1(A)和BMP2(B)過表達(dá)情況。*:p<0.05Fig.2ThemRNAexpressionofSIRT1andBMP2wasmeasuredusingreal-timePCR.*:p<0.05圖3Westernblot驗證腺病毒SIRT1過表達(dá)Fig.3TheexpressionofSIRT1wasmeasuredusingWesternblot.圖4Westernblot驗證腺病毒BMP2過表達(dá)Fig.4TheexpressionofBMP2wasmeasuredusingWesternblot.
本文編號:3358964
【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
腺病毒Ad-GFP,Ad-SIRT1以及Ad-BMP2感染C3H10細(xì)胞后在白光以及熒光顯微鏡下觀察其形態(tài)(100X)
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文22圖2Real-timePCR驗證SIRT1(A)和BMP2(B)過表達(dá)情況。*:p<0.05Fig.2ThemRNAexpressionofSIRT1andBMP2wasmeasuredusingreal-timePCR.*:p<0.05圖3Westernblot驗證腺病毒SIRT1過表達(dá)Fig.3TheexpressionofSIRT1wasmeasuredusingWesternblot.圖4Westernblot驗證腺病毒BMP2過表達(dá)Fig.4TheexpressionofBMP2wasmeasuredusingWesternblot.
重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文22圖2Real-timePCR驗證SIRT1(A)和BMP2(B)過表達(dá)情況。*:p<0.05Fig.2ThemRNAexpressionofSIRT1andBMP2wasmeasuredusingreal-timePCR.*:p<0.05圖3Westernblot驗證腺病毒SIRT1過表達(dá)Fig.3TheexpressionofSIRT1wasmeasuredusingWesternblot.圖4Westernblot驗證腺病毒BMP2過表達(dá)Fig.4TheexpressionofBMP2wasmeasuredusingWesternblot.
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