目的:骨肉瘤是一類(lèi)嚴(yán)重危害青少年生命和健康的疾病,近20年其五年生存率未見(jiàn)提高,肺轉(zhuǎn)移是其致死的首要原因,一旦發(fā)生,其五年生存率將低于30%。因此,尋找有效控制骨肉瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的治療靶點(diǎn)是骨肉瘤治療中亟需解決的問(wèn)題之一。單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1,又名CCL2）的表達(dá)與骨肉瘤惡性行為相關(guān)。探索CCL2對(duì)骨肉瘤增殖轉(zhuǎn)移的作用,特別是肺轉(zhuǎn)移中的作用和機(jī)制,有助于為控制骨肉瘤進(jìn)展提供新的治療策略。本課題主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行研究:（1）分析CCL2在骨肉瘤中的表達(dá)情況,及其與肺轉(zhuǎn)移的相關(guān)性;（2）探索CCL2對(duì)骨肉瘤增殖和轉(zhuǎn)移能力的調(diào)控作用及機(jī)制;（3）CCL2對(duì)骨肉瘤極化巨噬細(xì)胞M1/M2表型的影響。方法:在不同肺轉(zhuǎn)移潛能的骨肉瘤細(xì)胞株、動(dòng)物和臨床標(biāo)本上用RTPCR、western-blot及免疫組化檢測(cè)CCL2的表達(dá),分析其與骨肉瘤及其肺轉(zhuǎn)移的相關(guān)性;構(gòu)建CCL2穩(wěn)定干擾的骨肉瘤細(xì)胞株,采用CCK-8檢測(cè)增殖、劃痕檢測(cè)細(xì)胞遷移、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡、Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲改變等;同時(shí)將CCL2 RNA干擾的骨肉瘤細(xì)胞株及其對(duì)照組與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),采用RT-PCR檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

腫瘤微環(huán)境募集巨噬細(xì)胞并影響其極化

R 檢測(cè) CCL2 mRNA 在骨肉瘤細(xì)胞株中的表達(dá)（lot 檢測(cè) CCL2 蛋白在骨肉瘤細(xì)胞系中的表達(dá)t 結(jié)果可見(jiàn)骨肉瘤細(xì)胞株中 CCL2 蛋白的表達(dá)-E4 (p<0.05; p<0.001)；且在高肺轉(zhuǎn)移潛能的2 的表達(dá)高于相應(yīng)低肺轉(zhuǎn)移性的骨肉瘤細(xì)胞株層面驗(yàn)證了前面的結(jié)果。-blot 檢測(cè) CCL2 mRNA 在骨肉瘤細(xì)胞株中的表達(dá)

圖 1.1 RT-PCR 檢測(cè) CCL2 mRNA 在骨肉瘤細(xì)胞株中的表達(dá)（**: p<0.001）1.3.1.2 Western-blot 檢測(cè) CCL2 蛋白在骨肉瘤細(xì)胞系中的表達(dá)情況Western-blot 結(jié)果可見(jiàn)骨肉瘤細(xì)胞株中 CCL2 蛋白的表達(dá)明顯高于正常成骨細(xì)胞株 EC3T3-E4 (p<0.05; p<0.001)；且在高肺轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞株 LM8 和CCH-OS-D CCL2 的表達(dá)高于相應(yīng)低肺轉(zhuǎn)移性的骨肉瘤細(xì)胞株(p<0.05;p<0.001)。從蛋白層面驗(yàn)證了前面的結(jié)果。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞:在腫瘤演進(jìn)中的作用及潛在抗腫瘤靶點(diǎn)[J]. 董蓉,袁夢(mèng),應(yīng)美丹,曹戟,楊波.  藥學(xué)進(jìn)展. 2015(10)
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