[目的]鎂合金被視為有應(yīng)用前景的骨科植入材料,而且其植入后釋放出的鎂離子具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。本研究旨在檢測(cè)硫酸鎂對(duì)巨噬細(xì)胞極化和炎性細(xì)胞因子釋放的作用,并進(jìn)一步研究這種調(diào)節(jié)作用對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）軟骨分化的影響,以及對(duì)軟骨細(xì)胞增殖、遷移等功能的影響。我們希望我們的研究結(jié)果能夠?yàn)殒V合金在骨科的臨床應(yīng)用提供切實(shí)的理論基礎(chǔ)。[方法]首先,我們用脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的M1型分化,并用白介素-4（IL-4）誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型分化,采用不同濃度的硫酸鎂作用于誘導(dǎo)分化過程中的巨噬細(xì)胞,通過流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)硫酸鎂對(duì)巨噬細(xì)胞極化的影響。同時(shí),我們通過ELISA和RT-qPCR檢測(cè)硫酸鎂影響巨噬細(xì)胞極化時(shí),對(duì)其炎性細(xì)胞因子釋放的影響。然后,我們將M1型極化的巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基上清液加入到軟骨誘導(dǎo)液中,通過micromass法培養(yǎng)hBMSCs得到細(xì)胞微球,對(duì)其進(jìn)行組織學(xué)染色、糖胺聚糖（GAG）定量以及成軟骨相關(guān)基因表達(dá)的檢測(cè),評(píng)價(jià)巨噬細(xì)胞釋放的炎性細(xì)胞因子對(duì)hBMSCs軟骨分化的影響。同時(shí),通過上述方法我們檢測(cè)硫酸鎂調(diào)節(jié)的巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對(duì)hBMSCs軟... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

硫酸鎂對(duì)巨噬細(xì)胞LDH釋放的影響

圖 1.2 硫酸鎂對(duì)未極化的巨噬細(xì)胞表型的影響。圖 1.2 Effects of magnesium sulfate on the polarization of non-activated macrophages.（A）巨噬細(xì)胞 CCR7（代表 M1 型細(xì)胞）表達(dá)的流式柱狀圖結(jié)果。（B）巨噬細(xì)胞 CD206（代表 M2 型細(xì)胞）表達(dá)的流式柱狀圖結(jié)果。（C）3 次平行試驗(yàn)得出的巨噬細(xì)胞 CCR7 和CD206 表達(dá)陽(yáng)性率的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。在 LPS 和 IFN-γ 刺激 1 天后，巨噬細(xì)胞的 CCR7 和 CD206 表達(dá)陽(yáng)性率均大幅增加（圖 1.3）。有趣的是，同時(shí)采用 5mM 硫酸鎂處理細(xì)胞卻可以抑制 LPS 和IFN-γ 的作用，表現(xiàn)在 CCR7 陽(yáng)性率出現(xiàn)明顯下降而 CD206 陽(yáng)性率未出現(xiàn)明顯改變（圖 1.3）。硫酸鎂濃度增加到 20mM 同樣可以抑制巨噬細(xì)胞 CCR7 的表達(dá)，但其陽(yáng)性率減少的比例低于 5 mM 和 10 mM 硫酸鎂。由于 LPS 和 IFN-γ 造成的細(xì)胞死亡和損傷（如圖 1.1 所示），和只用硫酸鎂處理而未加 LPS 和 IFN-γ 刺激

硫酸鎂對(duì)LPS和IFN-γ刺激的巨噬細(xì)胞表型的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]New perspectives for articular cartilage repair treatment through tissue engineering: A contemporary review[J]. Giuseppe Musumeci,Paola Castrogiovanni,Rosalia Leonardi,Francesca Maria Trovato,Marta Anna Szychlinska,Angelo Di Giunta,Carla Loreto,Sergio Castorina.  World Journal of Orthopedics. 2014(02)
[2]Up-regulation of Cartilage Oligomeric Matrix Protein Gene Expression by Insulin-like Growth Factor-Ⅰ Revealed by Real Time Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction[J]. Hua TIAN~(1,2*) Ioannis STOGIANNIDIS~21 Department of Orthopaedics,Peking University Third Hospital,Beijing 100083,China;2 Coxa Hospital for Joint Replacement,Biokatu 6 b,Tampere 33101,Finland.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2006(10)

碩士論文
[1]DEC2和HIF-1α在骨肉瘤轉(zhuǎn)移侵襲中的作用及分子機(jī)制[D]. 胡涂.上海交通大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3308931