骨性關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis,OA）是一種由多種原因?qū)е碌囊躁P(guān)節(jié)軟骨破壞,軟骨下骨硬化以及滑膜炎癥為病理特征的慢性退變性關(guān)節(jié)疾病,隨著疾病的進(jìn)展,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)不可逆性破壞。OA發(fā)病率高,65歲以上的人群患病率超過50%,隨著我國人口老齡化的逐漸加重,OA的發(fā)病率更是會逐年上升,這將成為我國中老年人致殘的重要病因。盡管對OA進(jìn)行了大量的研究,但是其發(fā)病機(jī)制仍然不是很清楚。目前普遍認(rèn)同的觀點(diǎn)是關(guān)節(jié)內(nèi)的炎性環(huán)境對OA的發(fā)生和發(fā)展起著重要的作用。白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β）作為OA進(jìn)展過程中重要的炎性因子,不僅能增加多種促炎因子的分泌,而且還能促進(jìn)一氧化氮（nitric oxide,NO）、血小板反應(yīng)蛋白酶（thrombospondin motifs,ADAMTS）、基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）、前列腺素E₂（prostaglandin,PGE₂）等多種分解代謝因子的分泌,造成軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的破壞。此外,我們發(fā)現(xiàn)IL-1β還能激活軟骨細(xì)胞RhoA信號,使軟骨細(xì)胞內(nèi)纖維肌... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：博士

【圖文】：

布洛芬對軟骨細(xì)胞的計量效應(yīng)（A）不同濃度布洛芬處理軟骨細(xì)胞24小時后細(xì)胞凋亡情況

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文—50—3.2布洛芬對IL-1β引起的NO改變的影響實驗結(jié)果顯示：IL-1β處理組的NO含量增多了100%，顯著高于空白對照組(P<0.01)。預(yù)先用布洛芬處理軟骨細(xì)胞2小時后再加入IL-1β（IL-1β+布洛芬組）與單獨(dú)用IL-1β處理相比（IL-1β組），前者NO含量降低了50%（P<0.01），且與空白組相比，二者NO含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)果說明IL-1β引起軟骨細(xì)胞產(chǎn)生NO增加，同時布洛芬對IL-1β引起的NO增加有較強(qiáng)的抑制作用。圖2Griess實驗檢測各組培養(yǎng)基NO含量（**P<0.05,n=3）。3.3布洛芬對IL-1β引起的PGE2改變的影響實驗結(jié)果顯示：與對照相比，IL-1β組的培養(yǎng)基PGE2含量增多了32%(P<0.01)。而IL-1β+布洛芬組與IL-1β組相比，PGE2含量降低了15%（P<0.05）。這說明IL-1β引起軟骨細(xì)胞合成PGE2明顯增加，同時布洛芬對IL-1β引起PGE2的增加具有抑制作用。

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文—51—圖3ELISA實驗檢測各組培養(yǎng)基PGE2含量（*P<0.05,**P<0.01,n=3）。3.4布洛芬對IL-1β引起的軟骨細(xì)胞F-actin改變的影響通過軟骨細(xì)胞骨架鬼筆環(huán)肽染色，我們發(fā)現(xiàn)：與對照組相比，IL-1β組軟骨細(xì)胞F-actin更為緊實、密集、熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、應(yīng)力纖維（stressfiber）清晰可見，而IL-1β+布洛芬組軟骨細(xì)胞未有上述情況發(fā)生（圖4A）。我們應(yīng)用ImageJ圖像處理軟件定量F-actin的平均熒光密度，結(jié)果顯示：IL-1β處理的軟骨細(xì)胞F-actin的平均熒光密度明顯高于對照組（P<0.01），而IL-1β+布洛芬組與IL-1β組相比，前者F-actin平均熒光強(qiáng)度低于后者（P<0.05）（圖4B）。肌動蛋白在真核細(xì)胞中有兩種存在形式,即G-actin和F-actin，二者的總量在細(xì)胞中相對恒定。因此，我們應(yīng)用Westernblot對軟骨細(xì)胞內(nèi)F-actin與G-actin的比值（F-actin/G-actin）進(jìn)行測定。結(jié)果顯示：與對照相比，IL-1β組的軟骨細(xì)胞F-actin/G-actin明顯高于對照組的比值，增加了接近50%（P<0.05）。而IL-1β+布洛芬組與IL-1β組相比，前者減少了約30%（P<0.05），同時前者與對照組相比無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3305338