研究目的:脊髓是中樞神經(jīng)的重要組成部分之一,脊髓損傷不僅會(huì)給患者造成嚴(yán)重的感覺異常,還會(huì)引起患者脊髓損傷平面以下的軀體運(yùn)動(dòng)功能障礙,給患者及其家庭帶來了沉重的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前脊髓損傷治療的方法局限,僅能限制病情進(jìn)一步惡化。及時(shí)有效的恢復(fù)損傷脊髓的上下行電信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)于脊髓修復(fù)及其重要,更是脊髓損傷治療的關(guān)鍵點(diǎn)和難點(diǎn)。以干細(xì)胞為主的細(xì)胞替代治療方案已取得一定效果,而干細(xì)胞來源的外泌體（exosomes）與干細(xì)胞相比,在組織損傷修復(fù)中的優(yōu)勢(shì)更加明顯,能有效的避免干細(xì)胞移植引起的免疫排斥反應(yīng)和干細(xì)胞無序分化導(dǎo)致的腫瘤形成風(fēng)險(xiǎn)。本課題旨在探明人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosomes,hucMSC-Exs）對(duì)SD大鼠脊髓橫斷損傷模型的修復(fù)效果和分子機(jī)制,為hucMSC-Exs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和治療中的應(yīng)用提供新思路。研究方法:原代培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞并收集培養(yǎng)上清,提取hucMSC-Exs。Western blot、Nanosight和透射電鏡分別檢測(cè)hucMSC-Exs表面分子標(biāo)... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

間充質(zhì)干細(xì)胞在組織損傷中的修復(fù)作用

被誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞，在損傷脊髓組織損傷丟失大量神經(jīng)元細(xì)胞后為損傷組織的修復(fù)提供必需的神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞，最終促進(jìn)脊髓損傷的再生修復(fù)（圖 1.2 間充質(zhì)干細(xì)胞在神經(jīng)損傷修復(fù)中的作用機(jī)制）。為了提高間充質(zhì)干細(xì)胞在脊髓損傷修復(fù)領(lǐng)域的治療效果，材料化學(xué)技術(shù)和基因工程編輯技術(shù)常常被運(yùn)用來協(xié)助間充質(zhì)干細(xì)胞充分發(fā)揮更好的脊髓損傷修復(fù)效果。由于脊髓損傷發(fā)生后，活性細(xì)胞的丟失和脊髓組織結(jié)構(gòu)的降解是造成脊髓損傷修復(fù)窘境的主要原因，可降解生物材料結(jié)合間充質(zhì)干細(xì)胞移植就能很好地解決脊髓損傷后細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)難題，為脊髓損傷修復(fù)提供必需的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，兩者的協(xié)同作用能夠展現(xiàn)更好的脊髓損傷修復(fù)效果[28]。研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基中的多種營(yíng)養(yǎng)因子可以促進(jìn)神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)，體現(xiàn)了間充質(zhì)干細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)中的應(yīng)用潛能[29, 30]，外泌體作為細(xì)胞間通訊的主要載體，具有其來源細(xì)胞的類似的生物學(xué)作用，其在干細(xì)胞促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)中的作用需進(jìn)一步證明。

圖 2.1 技術(shù)路線一:hucMSC-Exs 修復(fù)模型的構(gòu)建.2 hucMSC-Exs 對(duì)脊髓橫斷損傷修復(fù)效果評(píng)價(jià)采用脊髓組織標(biāo)本 H&E 染色觀察脊髓損傷后脊組織降解范圍、膠質(zhì)瘢痕和組織情況，分析 hucMSC-Exs 保護(hù)損傷脊髓和抑制膠質(zhì)活化的作用。免疫組學(xué)染色分析脊髓損傷部位神經(jīng)元和突觸標(biāo)志蛋白的表達(dá)，評(píng)價(jià)脊髓損傷后神生。采用大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分評(píng)價(jià)脊髓損傷后大鼠后肢運(yùn)動(dòng)恢復(fù)情況損傷脊髓的再生和修復(fù)狀況（圖 2.2 hucMSC-Exs 在 SD 大鼠脊髓橫斷損傷中的修復(fù)效果評(píng)價(jià)）。


本文編號(hào)：3272758