目的:研究蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（PRMT2）在乳腺癌細(xì)胞MCF-7及MDA-MB-231中對(duì)細(xì)胞死亡率的影響,為乳腺癌病人內(nèi)分泌療法提供新的治療思路。方法:以體外培養(yǎng)的MDA-MB-231細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞為研究對(duì)象,通過將PRMT2基因進(jìn)行敲低或高表達(dá)處理,研究PRMT2在TAM誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡過程中的作用及其相關(guān)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)主要分為四個(gè)部分:1.分別將乳腺癌細(xì)胞PRMT2進(jìn)行高表達(dá)和低表達(dá)處理,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PRMT2的不同表達(dá)聯(lián)合TAM對(duì)乳腺癌細(xì)胞死亡的影響。2.通過細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)檢測(cè)高表達(dá)PRMT2對(duì)乳腺癌細(xì)胞周期的影響。3.利用蛋白質(zhì)免疫印跡法,從蛋白水平分析PRMT2高表達(dá)和低表達(dá)對(duì)乳腺癌細(xì)胞ER-α36、Akt及P-Akt表達(dá)的影響。4.通過免疫組化實(shí)驗(yàn),明確PRMT2和ER-α36在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況及其相互關(guān)系。結(jié)果:1.流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果提示:與對(duì)照組MCF-7-NC細(xì)胞相比較,MCF-7-sh PRMT2細(xì)胞經(jīng)0、7.5μmol/L TAM處理36小時(shí)后,細(xì)胞死亡率明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0001）。同樣,在相同濃度TAM處理MDA-MB... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PRMT2表達(dá)變化對(duì)抗雌激素藥物TAM對(duì)乳腺癌細(xì)胞死亡率的影響

圖 2 PRMT2 高表達(dá)對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞周期的影響。MDA-MB-231-NC 和 MDA-MB-231-PRMT2 細(xì)胞分別用 0μM、5μM TAM 處理 36h，然后收集、洗滌、PI 細(xì)胞染色、流式細(xì)胞分析。4.3 PRMT2 能抑制 ER-α36 的表達(dá)及其 PI3K/Akt 信號(hào)途徑

RMT2 表達(dá)變化對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。用濃度為 5μg/ml 的四環(huán)素誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-231-PRMT2、MDA-MB-231PRMT2 的表達(dá)增加對(duì) ER-α36、P-Akt、Akt 的影響；以慢病毒為載體的 shRNA 表 MCF-7 細(xì)胞 PRMT2，獲得 MCF-7-shPRMT2 細(xì)胞，以 MCF-7-NC 細(xì)胞作為對(duì)照PRMT2 的表達(dá)下降對(duì) ER-α36、P-Akt、Akt 的影響；目的蛋白均以 β-actin 為內(nèi)參PRMT2 與 ER-α36 在乳腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性為了進(jìn)一步研究 PRMT2 與 ER-α36 在乳腺癌組織中相互表達(dá)的關(guān)系，過采用組織芯片技術(shù)(US Biomax;BR1921)，對(duì) 160 例乳腺癌患者進(jìn)行了片分析。結(jié)果表明，大多數(shù)乳腺癌患者腫瘤組織均表達(dá) PRMT2 和（或36。其中，PRMT2 主要表達(dá)于細(xì)胞核，而 ER-α36 主要表達(dá)于細(xì)胞膜質(zhì)中（圖 4A）。通過對(duì)該 160 例乳腺癌患者進(jìn)行組織切片并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，P 值大于 0.05，提示 PRMT2 和 ER-α36 的在乳腺癌組織中的表達(dá)相關(guān)性(r=-0.024；P=0.765），與細(xì)胞觀察結(jié)果不一致（圖 4B）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新型雌激素受體ER-α36與乳腺癌[J]. 廉馨,史丹,李洪艷.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2015(01)



本文編號(hào)：3263168