目的:基于TGF-β1/Smad通路及NF/κB通路探究局部注射常山酮及吉格列汀細(xì)胞干預(yù)對骨性關(guān)節(jié)炎的作用及其機(jī)制:1)通過建立比格犬前叉韌帶橫斷膝骨性關(guān)節(jié)炎模型,采用軟骨下骨局部注射的方式給予常山酮干預(yù),分別從軟骨及軟骨下骨角度探討常山酮對骨性關(guān)節(jié)炎的作用及TGF-β1對這種炎癥的影響機(jī)理;2)通過分析人膝關(guān)節(jié)脛骨平臺中關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)并通過吉格列汀的藥物干預(yù),初步探究吉格列汀對白介素-1β的抑制,從而抑制II型膠原蛋白的降解。方法:1)通過建立比格犬前叉韌帶橫斷膝骨性關(guān)節(jié)炎模型,采用軟骨下骨局部注射的方式給予常山酮干預(yù)。造模并常山酮藥物干預(yù)后,分別在造模術(shù)后4周,8周及12周,對分組的比格犬模型進(jìn)行殘疾程度評分,Kellegren&Lawrence影像學(xué)骨性關(guān)節(jié)炎分級對比以及進(jìn)行核磁共振檢查,觀察膝關(guān)節(jié)骨髓水腫現(xiàn)象。同時,對活體模型抽取外周靜脈血通過免疫熒光分析對TGF-β1的表達(dá)測定對比;2)造模及給藥后12周處死動物模型,通過Micro-CT觀察軟骨下骨的微觀結(jié)構(gòu),采用番紅固綠染色及改良manking的OARSI評分評價比格犬關(guān)節(jié)軟骨破壞情況,通過HE染色觀察透明軟骨... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

雄性比格犬骨關(guān)節(jié)炎造模術(shù)前準(zhǔn)備Fig.1-1AdultmalebeagledogforACLTOAmodel.

圖 1-1 雄性比格犬骨關(guān)節(jié)炎造模術(shù)前準(zhǔn)備Fig.1-1 Adult male beagle dog for ACLT OA model.圖1-2 比格犬前叉韌帶橫斷建立骨關(guān)節(jié)炎模型Fig.1-2 Surgical procedure of ACLT OA model

持續(xù)性輕度負(fù)重異常；3分：肢體中度負(fù)重障礙；4分：肢體重度負(fù)重障礙，只能趾尖點地；5分：肢體完全無法負(fù)重。圖1-3 實驗動物模型殘疾程度評分系統(tǒng)Fig.1-3 Lameness Score System1.2.4 ACLT術(shù)后X線片OA分期造模前每組實驗對象全部完善X線片檢查，確認(rèn)比格犬為成年，骨骺線已閉。通常膝關(guān)節(jié)X線片的投射角度需近似與脛骨平臺平行，以清晰的顯露脛股關(guān)節(jié)，并使脛骨平臺的前后緣重疊；如果不能同時保證內(nèi)、外側(cè)脛骨平臺的前后緣都重疊，那么需要優(yōu)先保證磨損較輕一側(cè)脛骨平臺的前后緣重疊。膝關(guān)節(jié)正位X光片應(yīng)包括股骨的遠(yuǎn)端1/4和脛骨的近端1/4�？汕逦吹絻�(nèi)外股骨上髁最凸點；而脛骨髁間棘剛好位于股骨髁間窩的中央。脛骨近端與腓骨近端稍有重疊，而髕骨位于滑車溝稍上方且位于中線或中線的稍外側(cè)。并且研究OA需要通過評估膝關(guān)節(jié)間隙厚窄，因此實驗對象應(yīng)該是自然體重的完全負(fù)重前提下拍攝。然而該研究對象比格犬拍攝X線片具有特殊性，首先必須是非麻醉狀態(tài)下完成，其次需要多人配合將狗固定在拍攝球管前方最合適的方位，并確保狗直立穩(wěn)定的狀態(tài)下完成正位像及側(cè)位像（圖1-4）。

【參考文獻(xiàn)】：
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