目的:1、研究mi R-29a對PC12細胞向神經(jīng)細胞分化的影響,為進一步探究mi R-29a生物學作用奠定基礎(chǔ);2、探明mi R-29a調(diào)控PTEN表達,激活PTEN下游Akt通路。方法:1、以PC12細胞為研究對象,建立并篩選出高表達mi R-29a細胞株（PC12-p LKO-mi R-29a）,以高表達p LKO.1-puro-vector空載的細胞（PC12-p LKO-vector）作為對照;2、通過點突變及雙熒光報告基因明確mi R-29a作用于PTEN的m RNA位點;3、通過RT-PCR、細胞免疫熒光、Western blot觀察mi R-29a對PC12細胞軸突的影響。結(jié)果:1、mi R-29a能夠作用于PTEN的3′UTRs區(qū),并特異性地降低PTEN的表達量;2、mi R-29a能夠激活PTEN/Akt通路促進PC12細胞軸突伸長。結(jié)論:本研究初步證實mi R-29a能夠促進PC12細胞分化,軸突伸長,該過程同mi R-29a抑制PTEN表達,激活Akt通路有關(guān),能夠為mi R-29a治療神經(jīng)損傷提供研究基礎(chǔ) 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

NGF處理PC12細胞后，PTEN表達及細胞形態(tài)變化

增加（圖 2）。由于 miRNAs 作用與基因 3＇UTRs 區(qū)域后，能夠誘導 mR者降解，在 PC12D 和 PC12poorD 細胞中，miR-29a 同 PTEN 表達趨勢相果顯示，miR-29a 可能調(diào)控 PTEN 表達，進而影響軸突伸長。

孕 15 天直到成年小鼠腦組織中的 miR-29a 和 PTE我們可以看到：miR-29a 和 PTEN 存在負相關(guān)，隨白表達情況，結(jié)果顯示，PTEN 蛋白表達同 mRNA漸增加。（圖 3）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]MicroRNAs as novel regulators of stem cell fate[J]. Eunmi Choi,Ki-Chul Hwang.  World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[2]凋亡抑制蛋白Survivin在骨肉瘤中的表達及其與PTEN、cyclinD1蛋白表達的關(guān)系[J]. 段國慶,李書忠.  中國矯形外科雜志. 2007(03)



本文編號：3242082