目的:1、研究mi R-29a對(duì)PC12細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響,為進(jìn)一步探究mi R-29a生物學(xué)作用奠定基礎(chǔ);2、探明mi R-29a調(diào)控PTEN表達(dá),激活PTEN下游Akt通路。方法:1、以PC12細(xì)胞為研究對(duì)象,建立并篩選出高表達(dá)mi R-29a細(xì)胞株（PC12-p LKO-mi R-29a）,以高表達(dá)p LKO.1-puro-vector空載的細(xì)胞（PC12-p LKO-vector）作為對(duì)照;2、通過點(diǎn)突變及雙熒光報(bào)告基因明確mi R-29a作用于PTEN的m RNA位點(diǎn);3、通過RT-PCR、細(xì)胞免疫熒光、Western blot觀察mi R-29a對(duì)PC12細(xì)胞軸突的影響。結(jié)果:1、mi R-29a能夠作用于PTEN的3′UTRs區(qū),并特異性地降低PTEN的表達(dá)量;2、mi R-29a能夠激活PTEN/Akt通路促進(jìn)PC12細(xì)胞軸突伸長(zhǎng)。結(jié)論:本研究初步證實(shí)mi R-29a能夠促進(jìn)PC12細(xì)胞分化,軸突伸長(zhǎng),該過程同mi R-29a抑制PTEN表達(dá),激活A(yù)kt通路有關(guān),能夠?yàn)閙i R-29a治療神經(jīng)損傷提供研究基礎(chǔ) 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

NGF處理PC12細(xì)胞后，PTEN表達(dá)及細(xì)胞形態(tài)變化

增加（圖 2）。由于 miRNAs 作用與基因 3＇UTRs 區(qū)域后，能夠誘導(dǎo) mR者降解，在 PC12D 和 PC12poorD 細(xì)胞中，miR-29a 同 PTEN 表達(dá)趨勢(shì)相果顯示，miR-29a 可能調(diào)控 PTEN 表達(dá)，進(jìn)而影響軸突伸長(zhǎng)。

孕 15 天直到成年小鼠腦組織中的 miR-29a 和 PTE我們可以看到：miR-29a 和 PTEN 存在負(fù)相關(guān)，隨白表達(dá)情況，結(jié)果顯示，PTEN 蛋白表達(dá)同 mRNA漸增加。（圖 3）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MicroRNAs as novel regulators of stem cell fate[J]. Eunmi Choi,Ki-Chul Hwang.  World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[2]凋亡抑制蛋白Survivin在骨肉瘤中的表達(dá)及其與PTEN、cyclinD1蛋白表達(dá)的關(guān)系[J]. 段國(guó)慶,李書忠.  中國(guó)矯形外科雜志. 2007(03)



本文編號(hào)：3242082