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MiR-1224-5p通過TGF-β1/Smad3通路影響瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲

發(fā)布時(shí)間:2021-06-06 09:01
  瘢痕疙瘩是一種良性腫瘤,臨床表現(xiàn)為異常的增生,超出創(chuàng)傷的范圍,侵犯臨近組織,不能自行消退。瘢痕疙瘩常發(fā)生于耳部、下頜部、前胸部、肩背部及四肢關(guān)節(jié)等部位。瘢痕疙瘩的特征是成纖維細(xì)胞過度增殖和膠原的過度生成,經(jīng)常引起瘙癢、疼痛、外觀不良及功能障礙。臨床上雖然瘢痕疙瘩的治療方式多樣,如手術(shù),激素局部注射和放療等,但是瘢痕疙瘩的發(fā)病機(jī)制仍不明確,目前對(duì)瘢痕疙瘩發(fā)病機(jī)制的研究是急需解決的一大難題。MicroRNA(miRNA)是一類單鏈非編碼小分子RNA,影響多種細(xì)胞生物過程,如增殖、凋亡、分化及細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生。迄今為止,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了miRNA參與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展,如結(jié)直腸癌,乳腺癌,肺癌,淋巴瘤和肝臟腫瘤等。越來越多的證據(jù)表明在一些炎癥及皮膚腫瘤中的miRNA表達(dá)異常,包括瘢痕疙瘩。目前,國內(nèi)外關(guān)于miRNA在瘢痕疙瘩發(fā)病機(jī)制中研究尚處于起步階段。既往的研究發(fā)現(xiàn)miR-1224-5p在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用,參與了細(xì)胞的增殖、凋亡。miRNA被發(fā)現(xiàn)在一些腫瘤中存在異常表達(dá),例如直腸癌、膠質(zhì)瘤、肺癌等,但其在瘢痕疙瘩發(fā)病中的具體作用尚不清楚。本研究擬通過在體外培養(yǎng)的人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

MiR-1224-5p通過TGF-β1/Smad3通路影響瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲


倒置顯微鏡下觀察成纖維細(xì)胞爬出情況

免疫熒光,亮綠,成纖維細(xì)胞,波形蛋白


MiR-1224-5p 通過 TGF-β1/Smad3 通路影響瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲 第一部分2.1.2 細(xì)胞免疫化學(xué)鑒定情況將培養(yǎng) 2-4 代成纖維細(xì)胞進(jìn)行波形蛋白(vimentin,vim)免疫熒光染色,鏡下可見瘢痕疙瘩、正常成纖維細(xì)胞的胞漿發(fā)出亮綠色熒光,而細(xì)胞核無熒光。每張切片取 5 個(gè)高倍鏡視野,可見胞質(zhì)發(fā)出亮綠色熒光的為陽性細(xì)胞,計(jì)數(shù) 30 個(gè)細(xì)胞中陽性細(xì)胞的數(shù)目取平均值。3 次重復(fù)結(jié)果顯示陽性率為 100%,可以證實(shí)原代培養(yǎng)的細(xì)胞為較高純度的成纖維細(xì)胞,而非類上皮細(xì)胞(見圖 1-2)。

組織水,實(shí)驗(yàn)檢測,檢測比較,瘢痕疙瘩


圖 1-3 qRT-PCR 實(shí)驗(yàn)檢測 miR-1224-5p 在各組組織中 mRNA 水平表達(dá)量測比較 NS 組、KD 組 miR-1224-5p 組織水平表達(dá)量。結(jié)果:miR-1224-5p顯低于 NS 組(*P<0.05)(NS:正常皮膚組織組;KD:瘢痕疙瘩組) 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 驗(yàn)證 miR-1224-5p 在細(xì)胞中的表達(dá)熒光定量 PCR 檢測 miR-1224-5p 在皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá),結(jié)膚成纖維細(xì)胞相比,miR-1224-5p 在瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中的表達(dá).315±0.031 倍,表達(dá)量顯著下降,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3214057

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