目的觀察萊菔硫烷對H9C2心肌細胞冷缺氧/復氧損傷保護作用與劑量和處理時間的關系及相關機制。方法1實驗模型的建立和分組:第一部分SFN劑量的探討:實驗隨機分為Sham組:H9C2心肌細胞置于5%CO2、37℃常規(guī)條件下培養(yǎng);冷H/R組:用D-hanks液置換常規(guī)細胞培養(yǎng)液后,備一密封缺氧盒將H9C2心肌細胞放入,隨后密封加壓通入95%N2、5%CO230min,再將該缺氧盒置于4℃冰箱冷藏10h,再用常規(guī)細胞培養(yǎng)液將D-hanks液置換并將細胞置于培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)4h,SFN5μM預處理組、SFN10μM預處理組、SFN25μM預處理組、SFN100μM預處理組:細胞進行缺氧處理前12h用SFN終濃度為5、10、25、100μM的培養(yǎng)液將常規(guī)細胞培養(yǎng)液置換,后續(xù)處理與冷H/R組相同;第二部分SFN預處理時間的探討:實驗隨機分為冷H/R組;SFN預處理24h組、SFN預處理12h組、SFN預處理8h組、SFN預處理4h組、SFN預處理0.5h組:細胞進行缺氧處理前24、12、8、4、0.5h用SFN終濃度為10μM的培養(yǎng)液將常規(guī)細胞培養(yǎng)液置換,后續(xù)處理與冷H/R組相同。2檢測指標:倒置顯... 

【文章來源】：華北理工大學河北省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實驗研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 實驗細胞
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要儀器及設備
        1.1.4 主要自配試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 重復使用實驗用品處理方法
        1.2.2 實驗分組
        1.2.3 H9C2心肌細胞培養(yǎng)
        1.2.4 H9C2心肌細胞冷缺氧/復氧損傷模型的建立
        1.2.5 倒置顯微鏡下觀察H9C2心肌細胞形態(tài)學改變
        1.2.6 CCK-8 法檢測細胞存活率
        1.2.7 免疫印跡法（Western blot）操作步驟
        1.2.8 統(tǒng)計學處理
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 SFN計量的探討
        1.3.2 SFN預處理時間的探討
    1.4 討論
        1.4.1 心肌缺血再灌注損傷的機制
        1.4.2 萊菔硫烷的藥理特點及其在心肌IRI的作用
        1.4.3 II期酶HO-1、NQO1與缺血再灌注損傷
        1.4.4 Bcl-2 家族與缺血再灌注損傷
    參考文獻
第2章 綜述 Sulforaphane對心肌缺血再灌注損傷的保護作用
    2.1 萊菔硫烷
        2.1.1 萊菔硫烷對心肌缺血再灌注損傷的作用
    2.2 GSK-3β/mPTP通路的生物學特性
        2.2.1 GSK-3β的生物學特性
        2.2.2 mPTP的生物學特性
    2.3 GSK-3β/mPTP通路與心肌缺血再灌注損傷
    參考文獻
結(jié)論
不足與展望
致謝
導師簡介
作者簡介
學位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3204413