研究背景:骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis,OA）是最常見的關(guān)節(jié)炎類型。它是一種致殘、遲發(fā)和退行性疾病,特點(diǎn)是關(guān)節(jié)軟骨和滑膜炎癥消失,導(dǎo)致關(guān)節(jié)僵硬、腫脹、疼痛和活動性喪失。從流行病學(xué)的角度來看,目前骨關(guān)節(jié)炎影響全世界約半數(shù)的年齡超過65歲的人群,被認(rèn)為是首要致殘原因之一。盡管人工關(guān)節(jié)置換能有效地使晚期骨關(guān)節(jié)炎患者恢復(fù)關(guān)節(jié)功能、提高生活質(zhì)量,然而在疾病早期由于缺乏特定的癥狀或體征,很難診斷。因此,迫切需要新的生物標(biāo)志物用來診斷和治療早期骨關(guān)節(jié)炎。骨關(guān)節(jié)炎最初被認(rèn)為是一種與炎癥無關(guān)的磨損性疾病,而如今由于分子生物學(xué)的出現(xiàn),它正被重新定義為一種復(fù)雜的、多因素疾病。骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生過程中,軟骨損傷與炎癥基因上調(diào)有關(guān),后者可以通過多種信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)引發(fā)軟骨損傷。此外,炎癥因子還可以導(dǎo)致包括MMP和整合素在內(nèi)的蛋白酶類表達(dá)增加,使關(guān)節(jié)軟骨胞外基質(zhì)發(fā)生降解而加重病情。另外,軟骨細(xì)胞是關(guān)節(jié)軟骨的重要組成成分,正常情況下軟骨細(xì)胞的代謝十分活躍,對維持軟骨的正常結(jié)果和功能有著重要作用。當(dāng)炎癥因子通過MAPK、NF-Kappa B等胞內(nèi)信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)傳遞給轉(zhuǎn)錄因子,使軟骨細(xì)胞分化變?yōu)槔w維細(xì)胞樣的表型,促使... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
第一章 引言
    1.1 骨關(guān)節(jié)炎概述
    1.2 非編碼RNA
    1.3 長鏈非編碼RNA HULC
    1.4 MAPK和NF-κB信號通路在骨關(guān)節(jié)炎中的重要作用
    1.5 研究內(nèi)容與意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)對象及標(biāo)本處理
        2.1.2 細(xì)胞系
        2.1.3 引物
        2.1.4 表達(dá)載體構(gòu)建
        2.1.5 抗體信息及稀釋倍數(shù)
        2.1.6 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.7 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.8 磷酸鹽緩沖液PBS配制
        2.1.9 瓊脂糖凝膠電泳溶液配制
        2.1.10 TBST溶液配制
        2.1.11 PMSF配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 給藥處理
        2.2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.2.4 實(shí)時定量PCR檢測
        2.2.5 western blot蛋白表達(dá)檢測
        2.2.6 CCK-8細(xì)胞活力試驗(yàn)
        2.2.7 流式細(xì)胞術(shù)
        2.2.8 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)
        2.2.9 酶聯(lián)免疫吸附測定
        2.2.10 生物素-親和素RNA Pull-down實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 RNA免疫沉淀
        2.2.12 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 骨關(guān)節(jié)炎患者軟骨組織中HULC表達(dá)下調(diào)
    3.2 TNF-α誘導(dǎo)的ATDC5細(xì)胞炎性損傷模型建立
    3.3 HULC能夠減輕TNF-α誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎性損傷
    3.4 HULC可以直接與miR-101靶向結(jié)合
    3.5 HULC通過調(diào)節(jié)miR-101的表達(dá)減輕TNF-α誘導(dǎo)的ATDC5細(xì)胞炎性損傷
    3.6 HULC通過下調(diào)miR-101抑制了NF-κB和MAPK信號通路的激活
第四章 討論
結(jié)論
附圖、表
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
學(xué)位論文評閱及答辯情況
外文論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨關(guān)節(jié)炎:關(guān)節(jié)軟骨退變的相關(guān)研究與進(jìn)展[J]. 竇曉麗,段曉琴,夏玲,袁望舒,曲福玲,羅媛媛,劉忠良.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(20)



本文編號：3187705