發(fā)布時間：2021-05-15 07:18

　　目的由各種原因導致的骨缺損問題是目前臨床上的一個難題,但現有的解決方法弊端很多。神經肽Y可以促進干細胞向成骨細胞分化,本實驗通過神經肽Y與人臍帶間充質干細胞的作用來明確神經肽Y對人臍帶間充質干細胞成骨分化的影響,并嘗試構建新型的骨組織工程修復材料。方法本實驗分為兩部分,體內實驗和體外實驗。在體外實驗中,以人臍帶間充質干細胞為實驗細胞,神經肽Y作為成骨誘導因子,在培養(yǎng)過程中通過分組觀察堿性磷酸酶對成骨細胞的染色、茜素紅對鈣結節(jié)的染色、PCR技術對成骨相關基因的檢測分析以及Western Blot技術對成骨相關蛋白的檢測來觀察神經肽Y是否可以促進人臍帶間充質干細胞向成骨細胞分化。在體內實驗中,制備神經肽Y/I型膠原/β-TCP復合體,再選用SD大鼠為實驗動物構建大鼠顱骨缺損模型,將制備成功的神經肽Y/I型膠原/β-TCP復合體通過外科手術的方式植入到大鼠顱骨缺損模型中。SPF動物房繼續(xù)飼養(yǎng),并于第30天用頸椎脫臼法處死大鼠,獲取完整的顱骨標本。將標本進行Micro-CT掃描,觀察神經肽Y/I型膠原/β-TCP復合體對大鼠顱骨缺損的修復作用。結果通過堿性磷酸酶染色、茜素紅染色、PCR及Wes... 

【文章來源】：深圳大學廣東省

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
緒言
第一章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗細胞系
        2.1.2 實驗藥物及試劑
        2.1.3 實驗動物
        2.1.4 主要儀器設備
        2.1.5 主要培基及藥物配制
    2.2 方法
        2.2.1 體外實驗方法
            2.2.1.1 人臍帶血間充質干細胞復蘇與培養(yǎng)
            2.2.1.2 誘導干細胞向成骨細胞分化
            2.2.1.3 堿性磷酸酶染色
            2.2.1.4 茜素紅染色
            2.2.1.5 qRT-PCR定量實驗
            2.2.1.6 Western-blot檢測蛋白的表達
        2.2.2 體內實驗方法
            2.2.2.1 物品準備及術前大鼠處理
            2.2.2.2 大鼠稱重、麻醉
            2.2.2.3 大鼠手術及術后管理方法
            2.2.2.4 大鼠處死獲取標本及標本檢測
        2.2.3 實驗數據分析
第二章 實驗結果
    3.1 體外實驗
        3.1.1 神經肽Y可以提高人臍帶間充質干細胞誘導為成骨細胞的效率
        3.1.2 神經肽Y可以促進成骨細胞鈣結節(jié)的形成
        3.1.3 神經肽Y可以增加ALP,OCN,Runx2 以及β -catenin的mRNA表達
        3.1.4 神經肽Y對成骨細胞相關蛋白表達量的影響
    3.2 體內實驗
        3.2.1 神經肽Y/I型膠原/β -TCP凝膠的制備
        3.2.2 大鼠頭骨缺損模型的構建
        3.2.3 神經肽Y/I型膠原/β -TCP復合體整合至骨損傷處
        3.2.4 NPY可以明顯的促進大鼠顱骨損傷模型的修復
第三章 討論
結論
參考文獻
英文縮略詞簡表
神經營養(yǎng)因子在骨組織形成及骨組織損傷修復中的作用(綜述)
    參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間的研究成果



本文編號：3187209