目的由各種原因?qū)е碌墓侨睋p問(wèn)題是目前臨床上的一個(gè)難題,但現(xiàn)有的解決方法弊端很多。神經(jīng)肽Y可以促進(jìn)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)神經(jīng)肽Y與人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的作用來(lái)明確神經(jīng)肽Y對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響,并嘗試構(gòu)建新型的骨組織工程修復(fù)材料。方法本實(shí)驗(yàn)分為兩部分,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)。在體外實(shí)驗(yàn)中,以人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞,神經(jīng)肽Y作為成骨誘導(dǎo)因子,在培養(yǎng)過(guò)程中通過(guò)分組觀察堿性磷酸酶對(duì)成骨細(xì)胞的染色、茜素紅對(duì)鈣結(jié)節(jié)的染色、PCR技術(shù)對(duì)成骨相關(guān)基因的檢測(cè)分析以及Western Blot技術(shù)對(duì)成骨相關(guān)蛋白的檢測(cè)來(lái)觀察神經(jīng)肽Y是否可以促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,制備神經(jīng)肽Y/I型膠原/β-TCP復(fù)合體,再選用SD大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物構(gòu)建大鼠顱骨缺損模型,將制備成功的神經(jīng)肽Y/I型膠原/β-TCP復(fù)合體通過(guò)外科手術(shù)的方式植入到大鼠顱骨缺損模型中。SPF動(dòng)物房繼續(xù)飼養(yǎng),并于第30天用頸椎脫臼法處死大鼠,獲取完整的顱骨標(biāo)本。將標(biāo)本進(jìn)行Micro-CT掃描,觀察神經(jīng)肽Y/I型膠原/β-TCP復(fù)合體對(duì)大鼠顱骨缺損的修復(fù)作用。結(jié)果通過(guò)堿性磷酸酶染色、茜素紅染色、PCR及Wes... 

【文章來(lái)源】：深圳大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
緒言
第一章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
        2.1.5 主要培基及藥物配制
    2.2 方法
        2.2.1 體外實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1.1 人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)
            2.2.1.2 誘導(dǎo)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化
            2.2.1.3 堿性磷酸酶染色
            2.2.1.4 茜素紅染色
            2.2.1.5 qRT-PCR定量實(shí)驗(yàn)
            2.2.1.6 Western-blot檢測(cè)蛋白的表達(dá)
        2.2.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.2.1 物品準(zhǔn)備及術(shù)前大鼠處理
            2.2.2.2 大鼠稱重、麻醉
            2.2.2.3 大鼠手術(shù)及術(shù)后管理方法
            2.2.2.4 大鼠處死獲取標(biāo)本及標(biāo)本檢測(cè)
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析
第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 體外實(shí)驗(yàn)
        3.1.1 神經(jīng)肽Y可以提高人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞的效率
        3.1.2 神經(jīng)肽Y可以促進(jìn)成骨細(xì)胞鈣結(jié)節(jié)的形成
        3.1.3 神經(jīng)肽Y可以增加ALP,OCN,Runx2 以及β -catenin的mRNA表達(dá)
        3.1.4 神經(jīng)肽Y對(duì)成骨細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)量的影響
    3.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
        3.2.1 神經(jīng)肽Y/I型膠原/β -TCP凝膠的制備
        3.2.2 大鼠頭骨缺損模型的構(gòu)建
        3.2.3 神經(jīng)肽Y/I型膠原/β -TCP復(fù)合體整合至骨損傷處
        3.2.4 NPY可以明顯的促進(jìn)大鼠顱骨損傷模型的修復(fù)
第三章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮略詞簡(jiǎn)表
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子在骨組織形成及骨組織損傷修復(fù)中的作用(綜述)
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果



本文編號(hào)：3187209