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亞低溫干預(yù)下神經(jīng)干細(xì)胞RhoA/ROCK通路研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-28 11:33
  目的:亞低溫治療可以增加脊髓對(duì)缺血、缺氧的耐受性,降低免疫反應(yīng)及炎癥反應(yīng),減少自由基的產(chǎn)生。大量的動(dòng)物及臨床實(shí)驗(yàn)都表明,亞低溫可以促進(jìn)急性脊髓損傷神經(jīng)功能的恢復(fù),改善預(yù)后。RhoA/ROCK信號(hào)通路作為神經(jīng)軸突生長(zhǎng)的“分子開關(guān)”。RhoA選擇性抑制劑C3以及ROCK抑制劑Y-27632、法舒地爾在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中研究表明,阻斷RhoA/ROCK信號(hào)通路,可以減少神經(jīng)元的凋亡,促進(jìn)軸突生長(zhǎng),改善大鼠肢體運(yùn)動(dòng)功能。目前還沒有關(guān)于亞低溫與RhoA/ROCK信號(hào)通路關(guān)系的研究報(bào)告,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)亞低溫干預(yù)神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境,通過(guò)檢測(cè)RhoA/ROCK信號(hào)通路上相關(guān)基因、蛋白及離子濃度變化,初步推測(cè)亞低溫與RhoA/ROCK信號(hào)通路關(guān)系,為治療脊髓損傷提供更多切入點(diǎn)。方法:從Wistar胎鼠腦組織中提取神經(jīng)干細(xì)胞,經(jīng)過(guò)傳代培養(yǎng)后,獲得神經(jīng)干細(xì)胞懸液。利用自行設(shè)計(jì)的液壓沖擊裝置:用三通管將壓力表、注射器、培養(yǎng)瓶三者連接起來(lái),擺錘打擊注射器一端,壓力通過(guò)注射器內(nèi)的液體傳遞到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)細(xì)胞層,造成細(xì)胞損傷,通過(guò)上述原理制備大鼠神經(jīng)干細(xì)胞液壓損傷模型。將制備的大鼠神經(jīng)干細(xì)胞液壓沖擊傷模型隨機(jī)分為亞低溫組和常溫組... 

【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、現(xiàn)狀
    研究目的、方法
1 對(duì)象和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與分組
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.3.2 神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定
        1.3.3 神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記
        1.3.4 神經(jīng)干細(xì)胞液壓沖擊傷模型制備及實(shí)驗(yàn)分組
    1.4 RhoA/ROCK信號(hào)通路相關(guān)檢測(cè)
        1.4.1 神經(jīng)干細(xì)胞內(nèi)游離Ca~(2+)濃度的測(cè)定
        1.4.2 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgRmRNA的表達(dá)
        1.4.3 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgR蛋白的表達(dá)
        1.4.4 免疫熒光檢測(cè)RhoA/ROCK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 神經(jīng)干細(xì)胞形態(tài)及鑒定結(jié)果
    2.2 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgRmRNA的表達(dá)
    2.3 RhoA、ROCK、Nogo-A、NgR蛋白的表達(dá)
    2.4 熒光顯微鏡觀察RhoA/ROCK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)
    2.5 細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度測(cè)定
3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 亞低溫及RhoA/ROCK信號(hào)通路在脊髓損傷中的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Rho kinase:A new target for treatment of cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Qinghong Cui,Yongbo Zhang,Hui Chen,Jimei Li.  Neural Regeneration Research. 2013(13)
[2]1264例住院脊髓損傷患者的流行病學(xué)分析[J]. 郝春霞,李建軍,周紅俊,康海瓊,栗紹強(qiáng),劉根林,鄭櫻,衛(wèi)波,張纓,王一吉.  中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐. 2007(11)



本文編號(hào):3165406

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