目的:通過建立大鼠大腦中動脈（MCAO）栓塞模型,觀察Wnt/β-catenin信號通路在異氟醚（Isoflurane,ISO）后處理減輕腦缺血再灌注損傷中的作用,同時應(yīng)用Wnt/β-catenin信號通路的特異性抑制劑DKK-1及TGF-β1/Smad3通路的相關(guān)抑制劑LY2157299、SIS3,探討TGF-β1/Smad3通路對Wnt/β-catenin通路在異氟醚后處理減輕大鼠腦缺血再灌注損傷中的調(diào)控作用。方法:采用大腦中動脈栓塞法（middle cerebral artery occlusion,MCAO）缺血90min、再灌注24小時制備SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型,異氟醚后處理組于再灌注時立即使用1 MAC（1.5%）異氟醚對其進行后處理60min。各抑制劑組在術(shù)前30min經(jīng)腹腔或側(cè)腦室注射不同抑制劑（Wnt通路抑制劑DKK-1、TGF-β1抑制劑LY2157299、Smad3抑制劑SIS3）。于再灌注24小時時評估大鼠的各項指標(biāo)。用神經(jīng)功行為學(xué)評分、TTC染色評估實驗大鼠的神經(jīng)功能損傷及腦梗死的程度;TUNEL凋亡染色判定大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞的凋亡程度;N... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同藥物處理對腦缺血再灌注損傷大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷的影響

圖 3 不同藥物處理對腦缺血再灌注損傷大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元細胞凋亡的影響注：與 S 組相比，#P＜0.05；與 M 組相比，$P＜0.05；與 M+I 組相比，&P＜0.055. β-catenin、CyclinD1 在不同藥物處理及腦缺血再灌注損傷后在各組海馬CA1 區(qū)的表達如圖 4 所示，再灌注 24 h 之后，與 S 組比較，M 組損傷側(cè)海馬 CA1 區(qū) β-catenin、CyclinD1 的表達降低（P<0.05）；M+I 組較 M 組 β-catenin、CyclinD1 的表達明顯升高（P<0.05）；應(yīng)用 Wnt/β-catenin 通路抑制劑 DKK-1 之后，損傷側(cè)海馬 CA1 區(qū) β-catenin、CyclinD1 的表達降低（P<0.05）。

4 β-catenin、CyclinD1 在不同藥物處理及腦缺血再灌注損傷后在各組海馬 CA1 區(qū)的表 組相比，#P＜0.05，##P＜0.05；與 M 組相比，$P＜0.05，$$P＜0.05；與 M+I 組相比，&P＜0.05，&t/β-catenin 通路相關(guān)蛋白及 Caspase3 蛋白在異氟醚后處理腦缺血傷后的表達（Western blot、qRT-PCR）圖 5 所示，Western blot 顯示：與 S 組相比，M 組 Wnt/β-catenin 通路相關(guān)白 Wnt3a、β-catenin 以及 VEGF、CyclinD1 的表達降低（P<0.05），負性K-3β 及凋亡蛋白 Caspase3 的表達則增多（P<0.05）；與 M 組比較，M+I 組 nin 以及 VEGF、CyclinD1 的表達均明顯升高（P<0.05），GSK-3β 與 Casp低（P<0.05）。同樣是提前給予 Wnt/β-catenin 通路抑制劑 DKK-1 處理，后處理的 M+D+I 組其 Caspase3 的表達較未行異氟醚后處理的 M+D 組明.05）。


本文編號：3124382