目的:通過(guò)建立大鼠大腦中動(dòng)脈（MCAO）栓塞模型,觀察Wnt/β-catenin信號(hào)通路在異氟醚（Isoflurane,ISO）后處理減輕腦缺血再灌注損傷中的作用,同時(shí)應(yīng)用Wnt/β-catenin信號(hào)通路的特異性抑制劑DKK-1及TGF-β1/Smad3通路的相關(guān)抑制劑LY2157299、SIS3,探討TGF-β1/Smad3通路對(duì)Wnt/β-catenin通路在異氟醚后處理減輕大鼠腦缺血再灌注損傷中的調(diào)控作用。方法:采用大腦中動(dòng)脈栓塞法（middle cerebral artery occlusion,MCAO）缺血90min、再灌注24小時(shí)制備SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型,異氟醚后處理組于再灌注時(shí)立即使用1 MAC（1.5%）異氟醚對(duì)其進(jìn)行后處理60min。各抑制劑組在術(shù)前30min經(jīng)腹腔或側(cè)腦室注射不同抑制劑（Wnt通路抑制劑DKK-1、TGF-β1抑制劑LY2157299、Smad3抑制劑SIS3）。于再灌注24小時(shí)時(shí)評(píng)估大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)。用神經(jīng)功行為學(xué)評(píng)分、TTC染色評(píng)估實(shí)驗(yàn)大鼠的神經(jīng)功能損傷及腦梗死的程度;TUNEL凋亡染色判定大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡程度;N... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同藥物處理對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷的影響

圖 3 不同藥物處理對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響注：與 S 組相比，#P＜0.05；與 M 組相比，$P＜0.05；與 M+I 組相比，&P＜0.055. β-catenin、CyclinD1 在不同藥物處理及腦缺血再灌注損傷后在各組海馬CA1 區(qū)的表達(dá)如圖 4 所示，再灌注 24 h 之后，與 S 組比較，M 組損傷側(cè)海馬 CA1 區(qū) β-catenin、CyclinD1 的表達(dá)降低（P<0.05）；M+I 組較 M 組 β-catenin、CyclinD1 的表達(dá)明顯升高（P<0.05）；應(yīng)用 Wnt/β-catenin 通路抑制劑 DKK-1 之后，損傷側(cè)海馬 CA1 區(qū) β-catenin、CyclinD1 的表達(dá)降低（P<0.05）。

4 β-catenin、CyclinD1 在不同藥物處理及腦缺血再灌注損傷后在各組海馬 CA1 區(qū)的表 組相比，#P＜0.05，##P＜0.05；與 M 組相比，$P＜0.05，$$P＜0.05；與 M+I 組相比，&P＜0.05，&t/β-catenin 通路相關(guān)蛋白及 Caspase3 蛋白在異氟醚后處理腦缺血傷后的表達(dá)（Western blot、qRT-PCR）圖 5 所示，Western blot 顯示：與 S 組相比，M 組 Wnt/β-catenin 通路相關(guān)白 Wnt3a、β-catenin 以及 VEGF、CyclinD1 的表達(dá)降低（P<0.05），負(fù)性K-3β 及凋亡蛋白 Caspase3 的表達(dá)則增多（P<0.05）；與 M 組比較，M+I 組 nin 以及 VEGF、CyclinD1 的表達(dá)均明顯升高（P<0.05），GSK-3β 與 Casp低（P<0.05）。同樣是提前給予 Wnt/β-catenin 通路抑制劑 DKK-1 處理，后處理的 M+D+I 組其 Caspase3 的表達(dá)較未行異氟醚后處理的 M+D 組明.05）。


本文編號(hào)：3124382