背景骨肉瘤是兒童和青少年時(shí)期最常見的原發(fā)性骨惡性腫瘤。骨肉瘤生長迅速,具有高度侵襲性,常常在診斷時(shí)就發(fā)生了肺轉(zhuǎn)移。盡管骨肉瘤的治療在過去幾十年內(nèi)取得了重大的進(jìn)步,但骨肉瘤對化療藥物產(chǎn)生耐藥性是骨肉瘤患者存活率在過去幾十年內(nèi)始終無法顯著提高的重要原因。多效生長因子（pleiotrophin,PTN）是一種神經(jīng)生長因子,它參與包括細(xì)胞分化、增殖、遷移、血管生成等在內(nèi)的多種人體生理過程。諸多研究證實(shí)PTN在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用,有研究結(jié)果顯示PTN在化療療效較好和較差的兩組骨肉瘤患者中差異性表達(dá),也有研究報(bào)道PTN與神經(jīng)母細(xì)胞瘤的耐藥性有關(guān),但是PTN是否與骨肉瘤耐藥性相關(guān)尚未見報(bào)道。目的探索PTN在骨肉瘤細(xì)胞耐藥中的作用及其分子機(jī)制。方法（1）qRT-PCR和Western-blot檢測PTN在骨肉瘤耐藥株MG63/DOX和不耐藥親本細(xì)胞株MG63中的表達(dá)情況;（2）免疫組化ABC法檢測PTN在骨肉瘤組織中的表達(dá)并探索其表達(dá)的臨床意義;（3）通過藥物敏感試驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)和裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)從體內(nèi)體外水平探索PTN與骨肉瘤耐藥性的關(guān)系以及其中的分子機(jī)制。結(jié)果（1）PTN在耐藥細(xì)胞株MG6... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

CCK-8試驗(yàn)檢測骨肉瘤細(xì)胞對阿霉素的IC50值

量 PCR 檢測骨肉瘤細(xì)胞中 mRNA 的表達(dá)情況（β-actin 為內(nèi)中的 PTN 表達(dá)水平作為基線）e mRNAlevels of PTN in osteosarcoma cell lines were examinen was used as the reference gene and PTN expression in MG63the baseline).白在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況 Western blot 結(jié)果如圖 1-3 所示，相對于親代 MG63藥株 MG63/DOX 細(xì)胞中 PTN 表達(dá)水平顯著升胞中的表達(dá)量也顯著高于其他骨肉瘤細(xì)胞系如 M和 U2OS 等細(xì)胞系。

圖 1-2 實(shí)時(shí)定量 PCR 檢測骨肉瘤細(xì)胞中 mRNA 的表達(dá)情況（β-actin 為內(nèi)參，MG63 細(xì)胞中的 PTN 表達(dá)水平作為基線）Figure 1-2. The mRNAlevels of PTN in osteosarcoma cell lines were examined by quantitativeRT-PCR (β-actin was used as the reference gene and PTN expression in MG63 cells was used asthe baseline)..3 PTN 蛋白在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況接下來的 Western blot 結(jié)果如圖 1-3 所示，相對于親代 MG63 細(xì)胞，耐阿霉素的骨肉瘤耐藥株 MG63/DOX 細(xì)胞中 PTN 表達(dá)水平顯著升高。PTN 在MG63/DOX 細(xì)胞中的表達(dá)量也顯著高于其他骨肉瘤細(xì)胞系如 MNNG/HOS、SaoS2、143B 和 U2OS 等細(xì)胞系。2


本文編號：3103120