miR-29b-3p對大鼠脊髓缺血再灌注損傷后BMF表達(dá)及相關(guān)凋亡通路的影響
發(fā)布時間:2021-03-24 03:56
目的:在胸、腹主動脈瘤等大血管手術(shù)中,時常發(fā)生脊髓缺血再灌注損傷(Spinal Cord Ischemia-Reperfusion Injury,SCIRI)。SCIRI的預(yù)后不良,可導(dǎo)致截癱甚至死亡。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,轉(zhuǎn)錄水平相關(guān)的分子機(jī)制尚未明確。研究方法:通過夾閉主動脈弓14min,建立脊髓缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)模型。(1)隨機(jī)分為對照組(Sham組)、缺血再灌注組(IR-12h組、IR-24h組、IR-36h組、IR-48h組),通過Tarlov運動評分評估大鼠后肢運動功能,qRT-PCR和Western Blot探究miR-29b-3p與Bcl-2蛋白修飾因子(BMF)表達(dá)之間的關(guān)系。(2)隨機(jī)分為IR+miR-29b control組、IR+miR-29b mimic組,通過鞘內(nèi)注射miR-29b-3p模擬物,觀察其對BMF mRNA和蛋白表達(dá)水平的影響。(3)隨機(jī)分為Sham組、IR-36h組,使用帶有NeuN、GFP、Iba-1的雙重免疫熒光,觀察BMF在脊髓細(xì)胞中的分布。(4)隨機(jī)分為Sham組、IR組、IR+mi R-29b co...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組大鼠IR后后肢Tarlov運動評分
各組大鼠IR后12h、24h、36h、48hmiR-29b-3p的表達(dá)
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖2各組大鼠IR后12h、24h、36h、48hmiR-29b-3p的表達(dá)。注:n=3只/組,與Sham組比較,*P<0.05。3.1.2BMF為miR-29b-3p的靶標(biāo)BMFmRNA和蛋白的表達(dá)水平隨時間變化逐漸增加(P<0.05,圖3,4),與miR-29b-3p的表達(dá)變化趨勢完全相反。接下來的實驗均選擇差異最明顯的36h時間點進(jìn)行。用miR-29b-3pmimic轉(zhuǎn)染健康大鼠,結(jié)果顯示,miR-29b-3p模擬物顯著降低了BMF的mRNA和蛋白表達(dá)水平(P<0.05,圖5,6)。進(jìn)一步驗證了BMF可能為miR-29b-3p的靶標(biāo)。圖3各組脊髓中BMFmRNA表達(dá)。注:n=3只/組,與Sham組較,*P<0.05。
本文編號:3097006
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組大鼠IR后后肢Tarlov運動評分
各組大鼠IR后12h、24h、36h、48hmiR-29b-3p的表達(dá)
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖2各組大鼠IR后12h、24h、36h、48hmiR-29b-3p的表達(dá)。注:n=3只/組,與Sham組比較,*P<0.05。3.1.2BMF為miR-29b-3p的靶標(biāo)BMFmRNA和蛋白的表達(dá)水平隨時間變化逐漸增加(P<0.05,圖3,4),與miR-29b-3p的表達(dá)變化趨勢完全相反。接下來的實驗均選擇差異最明顯的36h時間點進(jìn)行。用miR-29b-3pmimic轉(zhuǎn)染健康大鼠,結(jié)果顯示,miR-29b-3p模擬物顯著降低了BMF的mRNA和蛋白表達(dá)水平(P<0.05,圖5,6)。進(jìn)一步驗證了BMF可能為miR-29b-3p的靶標(biāo)。圖3各組脊髓中BMFmRNA表達(dá)。注:n=3只/組,與Sham組較,*P<0.05。
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