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小腸粘膜下層(SIS)生物支架的構(gòu)建及骨修復(fù)機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-23 07:29
  研究目的:由疾病、外部創(chuàng)傷等原因引起的大骨骼缺損的治療需要通過(guò)骨移植手術(shù),尋找安全易得的替代骨已經(jīng)成為臨床上的重要課題,近年來(lái)快速發(fā)展的組織工程骨為解決這一難題提供了一種新的途徑。支架材料作為組織工程的核心要素,其表面性狀、結(jié)構(gòu),機(jī)械性能和生物學(xué)性能均能調(diào)控細(xì)胞的各種生命活動(dòng)和體內(nèi)組織的修復(fù)再生。本課題以天然去細(xì)胞基質(zhì)小腸粘膜下層(SIS)作為支架材料,研究其成骨活性及機(jī)制,并利用組織工程技術(shù)構(gòu)建基于SIS的復(fù)合支架,用于不同類(lèi)型骨缺損的修復(fù)。研究方法:(1)體外利用多種細(xì)胞模型,評(píng)估SIS對(duì)多種細(xì)胞的黏附,增殖,分化影響;體內(nèi)建立小鼠頭蓋骨4mm臨界缺損模型,評(píng)估SIS骨缺損修復(fù)效果并探究其修復(fù)機(jī)制。(2)制備SIS/PMMA復(fù)合骨水泥,體外表征材料的內(nèi)部形態(tài)及力學(xué)性能;并利用成骨細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等評(píng)估材料的生物學(xué)活性;體內(nèi)建立大鼠脊椎缺損模型,探究復(fù)合骨水泥骨整合能力及骨再生能力。(3)體外利用成骨細(xì)胞分泌的成骨基質(zhì)修飾SIS,體外觀察材料表面結(jié)構(gòu)以及材料對(duì)ADSCs的黏附、增殖、成骨分化情況;體內(nèi)建立小鼠頭蓋骨缺損模型,評(píng)價(jià)SIS,SIS/ADSCs,ECM,ECM-SIS... 

【文章來(lái)源】:寧波大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】:78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

小腸粘膜下層(SIS)生物支架的構(gòu)建及骨修復(fù)機(jī)制的研究


細(xì)胞系培養(yǎng);標(biāo)尺,200μm;(a)MC3T3-E1細(xì)胞;(b)NIH3T3細(xì)胞Figure1.1MorphologicalfeaturesofMC3T3-E1cellsandNIH3T3cells.Scalebar,200μm.

細(xì)胞培養(yǎng),標(biāo)尺,小鼠,間充質(zhì)干細(xì)胞


細(xì)胞培養(yǎng)第 4天出現(xiàn)放射狀排列,且呈克隆生長(zhǎng)(圖 1.2 b),第 5 天細(xì)胞融合達(dá)到 80%以上(圖1.2 c),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。我們通過(guò)不斷的換液傳代,在第三代的時(shí)候可以得到形態(tài)均一、胞漿豐富、呈梭形的間充質(zhì)干細(xì)胞,較原代細(xì)胞增殖快(圖 1.2 d)。

標(biāo)尺,成骨,堿性磷酸酶,細(xì)胞培養(yǎng)


圖 1.2 小鼠 BMSCs 細(xì)胞培養(yǎng);標(biāo)尺,50 μmre 1.2 Mouse bone marrow mesenchymal stem cells culture BMSCs 成脂、成骨、成軟骨誘導(dǎo)分化結(jié)果導(dǎo)分化過(guò)程中,細(xì)胞體積增大,部分細(xì)胞呈現(xiàn)出成紅染色,視野中多處可見(jiàn)粉紅色的鈣鹽沉積(圖 1.MSCs 經(jīng)誘導(dǎo)后大量分泌堿性磷酸酶(圖 1.3 b)。c da b


本文編號(hào):3095416

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