發(fā)布時(shí)間：2021-03-15 18:22

　　[目的]探討SDF-1/CXCR4信號(hào)軸對(duì)于退變椎間盤胞外基質(zhì)的影響及其潛在的作用機(jī)制。[方法]分別從年齡相匹配的椎間盤突出癥和脊柱骨折手術(shù)患者中獲取椎間盤組織,通過術(shù)前磁共振（MRI）采用Pfirrmann分級(jí)對(duì)椎間盤樣本進(jìn)行退變程度分組。免疫組化和western blot檢測(cè)兩個(gè)組椎間盤組織SDF-1、CXCR4、MMP-3,MMP9,Collagen Ⅱ和Aggrecan的表達(dá)。對(duì)取自椎間盤突出癥患者的組織進(jìn)行分離,細(xì)胞原代培養(yǎng)。取第3⁶代細(xì)胞加入100ng/ml SDF-1或轉(zhuǎn)染CXCR4小干擾RNA（siRNA）后共培養(yǎng)24 h,熒光定量PCR和western blot檢測(cè)CXCR4、Collagen Ⅱ和Aggrecan的表達(dá),Annexin V/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。為進(jìn)一步探討其潛在的分子機(jī)制,NF-κB抑制劑PDTC（20μmol/L）或CXCR4-siRNA轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞后,觀察NF-κB的主要基團(tuán)P65磷酸化水平（p-P65）及核轉(zhuǎn)移情況,胞外基質(zhì)的表達(dá)和細(xì)胞凋亡水平是否發(fā)生改變。[結(jié)果]通過MRI的Pfirrmann分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),椎間盤突出組... 

【文章來源】：中國矯形外科雜志. 2017,25(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 組織來源與細(xì)胞原代培養(yǎng)
    1.2 免疫組化
    1.3 si RNA轉(zhuǎn)染
    1.4 Real-time PCR檢測(cè)
    1.5 Western blot檢測(cè)
    1.6 細(xì)胞免疫熒光
    1.7 Annexin V/PI雙染法檢測(cè)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白藜蘆醇恢復(fù)去分化正常髓核細(xì)胞表型的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 沈皆亮,胡偵明,鐘小明,王大武,徐林飛.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2013(05)



本文編號(hào)：3084608