[目的]探討SDF-1/CXCR4信號軸對于退變椎間盤胞外基質(zhì)的影響及其潛在的作用機制。[方法]分別從年齡相匹配的椎間盤突出癥和脊柱骨折手術(shù)患者中獲取椎間盤組織,通過術(shù)前磁共振（MRI）采用Pfirrmann分級對椎間盤樣本進行退變程度分組。免疫組化和western blot檢測兩個組椎間盤組織SDF-1、CXCR4、MMP-3,MMP9,Collagen Ⅱ和Aggrecan的表達。對取自椎間盤突出癥患者的組織進行分離,細胞原代培養(yǎng)。取第3⁶代細胞加入100ng/ml SDF-1或轉(zhuǎn)染CXCR4小干擾RNA（siRNA）后共培養(yǎng)24 h,熒光定量PCR和western blot檢測CXCR4、Collagen Ⅱ和Aggrecan的表達,Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡率。為進一步探討其潛在的分子機制,NF-κB抑制劑PDTC（20μmol/L）或CXCR4-siRNA轉(zhuǎn)染髓核細胞后,觀察NF-κB的主要基團P65磷酸化水平（p-P65）及核轉(zhuǎn)移情況,胞外基質(zhì)的表達和細胞凋亡水平是否發(fā)生改變。[結(jié)果]通過MRI的Pfirrmann分級標準,椎間盤突出組... 

【文章來源】：中國矯形外科雜志. 2017,25(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 組織來源與細胞原代培養(yǎng)
    1.2 免疫組化
    1.3 si RNA轉(zhuǎn)染
    1.4 Real-time PCR檢測
    1.5 Western blot檢測
    1.6 細胞免疫熒光
    1.7 Annexin V/PI雙染法檢測
    1.8 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]白藜蘆醇恢復去分化正常髓核細胞表型的實驗研究[J]. 沈皆亮,胡偵明,鐘小明,王大武,徐林飛.  中國修復重建外科雜志. 2013(05)



本文編號：3084608