內皮祖細胞通過Talin-1促進骨髓來源巨噬細胞遷移和破骨細胞分化的研究
發(fā)布時間:2021-03-15 00:59
背景目的:破骨細胞介導的骨吸收在骨愈合中起重要作用。內皮祖細胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)通過刺激新血管形成和成骨作用促進骨修復。目前,EPCs在破骨細胞形成和功能發(fā)揮中的作用尚不明確。本研究旨在探究EPCs對骨髓來源巨噬細胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)向破骨細胞分化及功能發(fā)揮的影響。材料和方法:首先,利用體外分離培養(yǎng)體系,建立了穩(wěn)定的、可行的體外EPC分離培養(yǎng)模型。同時,利用體外誘導培養(yǎng)體系,建立了添加RANKL和M-CSF誘導培養(yǎng)BMM模型。通過TRAP染色及破骨細胞特異表達基因鑒定破骨細胞的特征。通過EPC-BMM共培養(yǎng)體系、CCK-8、qRT-PCR、細胞遷移和管腔形成實驗驗證共培養(yǎng)的EPC與BMM體系對BMM增殖、遷移和破骨分化能力的影響。通過TRAP染色和ELISA檢測EPC與BMM共培養(yǎng)后,培養(yǎng)基中TGF-β1表達量變化。使用TGF-β1抑制劑對共培養(yǎng)體系中BMM向破骨細胞分化能力的影響。通過siRNA干擾TALIN1基因、qPCR和Western blot實驗檢測共培養(yǎng)體系中缺失T...
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
P3代內皮祖細胞的細胞形態(tài)(100X)
誘導內皮祖細胞的血管形成(100X)
P3代內皮祖細胞免疫熒光鑒定(400X)
本文編號:3083276
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
P3代內皮祖細胞的細胞形態(tài)(100X)
誘導內皮祖細胞的血管形成(100X)
P3代內皮祖細胞免疫熒光鑒定(400X)
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