目的:探討雌激素受體（Estrogen Receptor,ER）陽(yáng)性乳腺癌他莫昔芬（Tamoxifon,TAM）耐藥對(duì)化療藥物敏感性的影響及其機(jī)制,尋找臨床TAM耐藥患者的敏感化療藥物及相應(yīng)的分子標(biāo)志物。方法:采用小濃度持續(xù)誘導(dǎo)法在ER陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞系中建立TAM耐藥細(xì)胞系,通過(guò)CCK-8法驗(yàn)證其對(duì)TAM的耐藥性、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的變化、transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力、Western blot驗(yàn)證耐藥細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物的變化。通過(guò)基因芯片和生物信息學(xué)方法尋找TAM耐藥的靶基因,并在建立好的耐藥模型中進(jìn)行驗(yàn)證。使用不同濃度的臨床常用化療藥物阿霉素（Adriamycin,ADR）、紫杉醇（Paclitaxel,PTX）和順鉑（Cisplatin,CP）處理TAM耐藥及敏感細(xì)胞,CCK-8法評(píng)估細(xì)胞在TAM耐藥后對(duì)不同化療藥物的敏感性。使用小干擾RNA（Small interfering RNA,siRNA）改變耐藥細(xì)胞中靶基因的表達(dá)后檢測(cè)其對(duì)化療藥物敏感性的變化。收集TAM耐藥患者的臨床病理信息和詳細(xì)治療方案,追蹤其后續(xù)化療效果,評(píng)估其對(duì)各種化療方案的緩解情況,同時(shí)收集患者治療前... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：118 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

TAM耐藥細(xì)胞的建立與鑒定Figure1.1.EstablishmentofTAM-resistantbreastcancercells（A）TAM耐藥細(xì)胞的形態(tài)較野生型ER陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞更為扁平，以尖角形和多角形為主，排列無(wú)規(guī)則且分散，在形態(tài)上更具有侵襲性

TAM耐藥細(xì)胞的增殖能力明顯增強(qiáng)Figure1.2.TAM-resistantcellshavestrongerproliferationability（A,B）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)TAM耐藥細(xì)胞MCF-7R和T47D相較與TAM敏感細(xì)

MCF-7R細(xì)胞較MCF-7細(xì)胞的侵襲能力明顯增強(qiáng)Figure1.3.MCF-7RcellshavestrongerinvasiveabilitycomparedwithMCF-7cells（A，B）Transwell實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明在24h、32h、40h和48h時(shí)MCF-7R發(fā)生遷移、侵襲的細(xì)胞數(shù)明顯多于MCF-7細(xì)胞(*p<0.05,**p<0.01and***p<0.001)


本文編號(hào)：3077521