第一部分自噬在袖狀胃切除術(shù)治療2型糖尿病大鼠中的機制研究隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活方式的改變,全球范圍內(nèi)2型糖尿病患病率呈逐年上升趨勢,而肥胖與2型糖尿病的發(fā)生有緊密聯(lián)系。肥胖合并2型糖尿病患者常伴有非酒精性脂肪性肝病和心腦血管等疾病,其特點是肝臟中血脂代謝異常以及甘油三酯（TG）以脂滴的形式過度積累。臨床研究表明,袖狀胃切除術(shù)用于治療減重和2型糖尿病的治療,具有操作簡單、手術(shù)時間短、并發(fā)癥少等特點,使其成為廣泛采用的治療減重與糖尿病的術(shù)式,然而其對于治療2型糖尿病的機制尚不明確。近年來隨著對自噬機制的深入研究,不斷有證據(jù)表明,自噬在糖代謝和脂質(zhì)代謝中起到重要作用,這提示了自噬對于2型糖尿病緩解的潛在機制。前期工作表明袖狀胃切除術(shù)中對于2型糖尿病大鼠模型肝臟脂肪過度積累逆轉(zhuǎn)、血糖下降、胰島素抵抗改善。本研究旨在探究袖狀胃切除術(shù)后大鼠肝臟自噬的變化對于降低肝臟脂質(zhì)和緩解糖尿病的作用。第二部分EGCG對過氧化氫誘導(dǎo)的α-細胞氧化應(yīng)激保護作用的研究低血糖是糖尿病患者實現(xiàn)穩(wěn)定代謝控制的一個主要障礙,這是一個嚴(yán)重的臨床問題。隨著糖尿病的進展,胰腺細胞對抗低血糖的能力受損;然而,目前尚不清楚在低... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
第一部分 自噬在袖狀胃切除術(shù)治療2型糖尿病大鼠中的機制研究
    摘要
    Abstract
第二部分 EGCG對過氧化氫誘導(dǎo)的α-細胞氧化應(yīng)激保護作用的研究
    摘要
    Abstract
第一部分 自噬在袖狀胃切除術(shù)治療2型糖尿病大鼠中的機制研究
    第1章 前言
        1.1 2型糖尿病的研究背景
        1.2 2型糖尿病的發(fā)病原因和機理
            1.2.1 環(huán)境因素
            1.2.2 遺傳因素
        1.3 2型糖尿病的治療方法
            1.3.1 二甲雙胍
            1.3.2 噻唑烷二酮類
            1.3.3 磺酰脲類
            1.3.4 胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）極其類似物
            1.3.5 針對減輕心血管并發(fā)癥的藥物
            1.3.6 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑
            1.3.7 他汀類藥物
            1.3.8 阿司匹林
        1.4 2型糖尿病的影響因素
            1.4.1 遺傳因素對2型糖尿病的影響
            1.4.2 細胞機制
        1.5 減重手術(shù)的研究背景
            1.5.1 減重手術(shù)機制的研究
            1.5.2 減重手術(shù)術(shù)式
        1.6 自噬的研究背景
            1.6.1 自噬過程
            1.6.2 自噬在肝臟脂代謝中的研究
    第2章 實驗材料與方法
        2.1 動物分組和二型糖尿病模型的建立
            2.1.1 實驗動物的分組和喂養(yǎng)
            2.1.2 袖狀胃切除術(shù)的實施
        2.2 肝臟總蛋白樣品的提取
        2.3 總蛋白的定量和變性
            2.3.1 BCA法測定蛋白濃度
        2.4 蛋白免疫印跡分析（Western Blot）
            2.4.1 SDS-PAGE膠的配制
            2.4.2 電泳
            2.4.3 轉(zhuǎn)膜
            2.4.4 封閉
            2.4.5 孵育一抗
            2.4.6 孵育二抗
            2.4.7 顯影
            2.4.8 灰度值分析
        2.5 RT-PCR
            2.5.1 組織總RNA的提取
            2.5.2 RNA樣本濃度的測定
            2.5.3 熒光定量PCR
            2.5.4 引物序列
        2.6 肝臟組織免疫熒光檢測方法
            2.6.1 組織的固定
            2.6.2 包埋
            2.6.3 切片
            2.6.4 封閉
            2.6.5 孵育一抗
            2.6.6 孵育二抗
        2.7 血脂指標(biāo)的測定
            2.7.1 大鼠血清的制備
            2.7.2 血脂指標(biāo)的檢測
    第3章 實驗結(jié)果
        3.1 術(shù)后肝臟自噬水平的檢測
            3.1.1 Western Blot驗證術(shù)后肝臟自噬水平
            3.1.2 免疫熒光驗證袖狀胃術(shù)后肝臟自噬水平
            3.1.3 Western Blot驗證Bcl-xL的表達
            3.1.4 自噬相關(guān)基因在實施袖狀胃切除術(shù)后大鼠肝臟中的表達情況
        3.2 血脂指標(biāo)的檢測
        3.3 脂肪酶的檢測
    第4章 討論
    第5章 結(jié)論
第二部分 EGCG對過氧化氫誘導(dǎo)的α-細胞氧化應(yīng)激保護作用的研究
    第1章 前言
        1.1 糖尿病合并低血糖
        1.2 EGCG功能的研究背景
            1.2.1 抗氧化作用
            1.2.2 對代謝的影響
            1.2.3 EGCG的抗炎作用
        1.3 自由基研究背景
        1.4 氧化應(yīng)激研究背景
        1.5 機體中自由基的產(chǎn)生和氧化應(yīng)激
    第2章 實驗材料與方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 ROS檢測
        2.3 細胞活力檢測
        2.4 胰高血糖素分泌的檢測
        2.5 細胞凋亡檢測
        2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    第3章 實驗結(jié)果
        3.1 EGCG對過氧化氫處理的α-細胞的細胞活性的影響
            3.1.1 活性氧的檢測
            3.1.2 細胞活性檢測
        3.2 胰高血糖素原mRNA的檢測
        3.3 EGCG和過氧化氫對細胞凋亡的影響
    第4章 討論
    第5章 結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄Ⅰ 在校期間發(fā)表的文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Complex role of autophagy in regulation of hepatic lipid and lipoprotein metabolism[J]. Mostafa Zamani,Jennifer Taher,Khosrow Adeli.  The Journal of Biomedical Research. 2017(05)
[2]胃旁路術(shù)與低熱量飲食減重對2型糖尿病患者血糖及腸促胰島激素水平的影響[J]. 李平,陳名道.  中華內(nèi)分泌代謝雜志. 2008 (05)



本文編號：3033931