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過表達(dá)CCR7的C3H10 T1/2細(xì)胞在小鼠皮膚移植模型的免疫抑制作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-23 11:55
  在整形外科領(lǐng)域,會(huì)經(jīng)常面對由大面積燒傷、創(chuàng)傷、腫瘤切除帶來的機(jī)體組織及器官缺損及功能障礙。相比于自體組織移植修復(fù),異體復(fù)合組織移植(composite tissue allotransplant, CTA)無疑是目前臨床可選的最可靠的一種修復(fù)手段。但是移植術(shù)后的免疫排斥反應(yīng)一直是異體復(fù)合組織移植難以逾越的障礙。目前臨床上主要使用各類免疫抑制藥物來避免和減輕移植后的免疫排斥反應(yīng),但有效的免疫抑制藥物不僅費(fèi)用高昂,而且伴有增加感染風(fēng)險(xiǎn)以及惡性腫瘤發(fā)生幾率的副作用,長期使用帶來的血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及肝腎功能的損害更會(huì)嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。近年來,人們發(fā)現(xiàn)了間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)具有調(diào)控移植免疫的能力,MSCs獨(dú)有的便捷性、安全性更是讓其成為了研究熱點(diǎn)。經(jīng)過多年研究,間充質(zhì)干細(xì)胞對于移植后免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)能力已得到了學(xué)界的廣泛肯定,在臨床試驗(yàn)性治療中也得到了認(rèn)可。目前MSC的免疫抑制作用機(jī)制尚不完全清楚,一般認(rèn)為間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能可能是通過分泌各種細(xì)胞因子以及對免疫細(xì)胞的直接接觸而產(chǎn)生抑制作用。次級淋巴器官(secondary lymphatic organs,SLOs)已被發(fā)現(xiàn)在M... 

【文章來源】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:40 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

過表達(dá)CCR7的C3H10 T1/2細(xì)胞在小鼠皮膚移植模型的免疫抑制作用的研究


熒光顯微鏡下細(xì)胞熒光

流式細(xì)胞術(shù),基因,檢測結(jié)果,細(xì)胞


標(biāo)記轉(zhuǎn)染CCR7基因的細(xì)胞,流式結(jié)果顯示CCR7+組的陽性細(xì)胞比例達(dá)到95.20%,??而C組10組CCR7+細(xì)胞比例僅為1.27%,送說明CCR7+組細(xì)胞中CCR7基因成功??轉(zhuǎn)染并表達(dá)(圖2)。??■?987?1.27?■?4.巧?巧.2??60"??60?*??A?。At??■?I???I?1111|?I?I?I?I?I?lll|?_T".T*、I?I,?iq????10。?10^?1〇2?巧3?巧4?記。,〇1?1〇2?1〇3??C3H10組?CCR7+組??圖2?CD197?(CCR7)流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果??鏡下炎光及流式細(xì)胞結(jié)果顯示CCR7-EGFP基因己被成功導(dǎo)入C3H10?T1/2細(xì)??胞并表達(dá),可作為進(jìn)一步試驗(yàn)研究的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞使用。??9??

示意圖,皮片,面積計(jì)算,頸椎


清理植皮區(qū)分泌物后拍照記錄,塑料紙描邊記錄皮片面積大小并繪制比例??尺,經(jīng)等比例掃描后使用Photoshop軟件統(tǒng)計(jì)圖片像素點(diǎn)數(shù)量,通過換算得出皮片??面積數(shù)據(jù),如圖所示。(圖4)??m???r?i。茲個(gè)圖礦—?,-!??平謝1:城.16?創(chuàng)??議A標(biāo)票離-百鱗;.??m?t?J?**■?1865?脫齡銀規(guī)?1??I?—?一?I ̄ ̄??圖4術(shù)后第12天皮片存活面積計(jì)算示意圖??2.3.2皮膚姐織病理檢查?小鼠皮膚移植術(shù)后第12天,采用頸椎脫白法處死各??實(shí)驗(yàn)組小鼠,超凈臺(tái)無菌條件下,獲取移植皮片組織,并W組織標(biāo)本固定液固定,??而后酒精溶液梯度脫水,制備石蠟切片,HE病理染色,于光學(xué)顯微鏡下觀察組織??病理情況、采集圖像。??2.3.3受體小鼠脾淋己細(xì)胞表達(dá)檢測??1.


本文編號(hào):2995167

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