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miR-126促進(jìn)脊髓損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化

發(fā)布時(shí)間:2020-12-29 22:00
  目的:從分子、組織、整體水平觀察小鼠脊髓損傷(Spinal Cord Injury,SCI)后miR-126對(duì)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞(Endogenous Neural Stem Cells,ENSCs)增殖和分化以及運(yùn)動(dòng)功能修復(fù)的影響。方法:應(yīng)用NYU脊髓撞擊損傷儀(M-III)(MASCIS Impactor(M-III))制作小鼠胸10(T10)脊髓挫傷模型,分別在損傷后不同時(shí)期采用Basso Mouse Scale(BMS)評(píng)分對(duì)運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行評(píng)估;然后,應(yīng)用蘇木精-伊紅染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)、尼氏染色(Nissl’s staining)觀察損傷部位組織病理學(xué)及尼氏體的變化;免疫熒光(Immunofluorescence technic,IF)檢測ENSCs的數(shù)量變化;免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)檢測HOXA9表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù);逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Real-Time PCR,RT-PCR)檢測miR-126,Nestin,HOXA9表達(dá)量,同時(shí)蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting,WB)檢測相應(yīng)蛋... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

miR-126促進(jìn)脊髓損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化


對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組不同時(shí)期中樞神經(jīng)系統(tǒng)整體觀對(duì)照組脊髓呈瓷白色,圓柱狀,硬脊膜完整;實(shí)驗(yàn)組1d損傷部位呈現(xiàn)暗紫色斑塊,局部腫脹,

比例尺,樣本,暗紫色,硬脊膜


對(duì)照組 1 d 3 d 7 d 14 d 21 d 28 d圖 1-1 對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組不同時(shí)期中樞神經(jīng)系統(tǒng)整體觀對(duì)照組脊髓呈瓷白色,圓柱狀,硬脊膜完整;實(shí)驗(yàn)組 1 d 損傷部位呈現(xiàn)暗紫色斑塊,局部腫脹,硬脊膜完整;3-14 d 暗紫色斑塊及腫脹逐漸消退;21 d,28 d 損傷部位暗紫色斑塊消失,脊髓損傷部位脊髓容量減小,形態(tài)呈扁平狀,硬脊膜完整。(比例尺=1.0 cm)

脊髓,正中動(dòng)脈,硬脊膜,椎板


圖 1-3 SCI 模型的制作圖 A 為去除 T10 椎板后,脊髓呈瓷白色,硬脊膜完整,可見紅色脊髓后正中動(dòng)脈;圖 B 為 M-錯(cuò)誤!未定義書簽。脊髓撞擊損傷儀按照設(shè)計(jì)程序撞擊暴露脊髓;圖 C 為脊髓撞擊后,可見撞擊處暗紫色局部隆起包塊,硬脊膜完整。(A:脊髓撞擊前;B:脊髓撞擊中;C:脊髓撞擊后。)2.2 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組 BMS 評(píng)分術(shù)前實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組 BMS 評(píng)分均無差異,術(shù)后實(shí)驗(yàn)組在 1 d,3 d 時(shí)運(yùn)動(dòng)功能完全喪失;7 d 時(shí)運(yùn)動(dòng)功能出現(xiàn)恢復(fù)跡象;14 d,21 d 恢復(fù)較為顯著;第 28 d 時(shí)趨于平穩(wěn),但與 21 d 時(shí)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表 1-3;圖 1-4)。表 1-3 對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組在不同時(shí)期的 BMS 評(píng)分(n=6;*P<0.05;**P<0.01)Group 1 d 3 d 7 d 14 d 21 d 28 dControl 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00Experimental 0.00 0.00 2.35±0.51**2.76±0.53**3.45±0.45**3.62±0.56**

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]miR-126的研究進(jìn)展[J]. 韓慶,廖艷丹.  廣東醫(yī)學(xué). 2013(13)
[3]MicroRNAs-126(miR-126)的生物學(xué)功能[J]. 楊東,張紅.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2012(14)
[4]miR-126信號(hào)在神經(jīng)干細(xì)胞向膽堿能神經(jīng)元分化過程中的作用[J]. 易松敏,蔚洪恩,鄧春圣,李鵬飛,王春芳.  實(shí)用骨科雜志. 2011(12)
[5]脊髓損傷機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 李俊麗,趙鐸.  中國實(shí)用神經(jīng)疾病雜志. 2009(24)
[6]脊髓損傷模型的研究進(jìn)展[J]. 郭志寶,王偉.  神經(jīng)損傷與功能重建. 2009(02)

博士論文
[1]神經(jīng)干細(xì)胞與運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的microRNA和蛋白質(zhì)差異表達(dá)及相互作用[D]. 蔚洪恩.第二軍醫(yī)大學(xué) 2011



本文編號(hào):2946399

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