發(fā)布時間：2020-12-24 15:48

　　背景骨肉瘤（osteosarcoma,OS）是兒童和青少年中最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,常發(fā)生于長骨干骺端,其特點是復(fù)發(fā)率高,預(yù)后差。盡管輔助化療和晚期手術(shù)相結(jié)合,患者的5年累積生存率仍然不太樂觀。微小RNA（micro RNAs,mi RNAs）是一小類內(nèi)源性非編碼RNA,其長度范圍從18到25個核苷酸。研究表明mi RNA影響腫瘤微環(huán)境并與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展有著密不可分的關(guān)系。目的1.檢測mi R-885-5p在骨肉瘤細胞和組織中的表達水平。2.探討mi R-885-5p在骨肉瘤組織中表達與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。3.觀察mi R-885-5p對骨肉瘤細胞的生物學(xué)行為的影響。4.探尋mi R-885-5p的靶基因,闡明其對靶基因的調(diào)節(jié)機制。方法1.利用實時熒光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-q PCR）技術(shù)檢測MG63,U2OS人骨肉瘤細胞系和h FOB1.19人正常成骨細胞株中mi R-885-5p表達水平。2.收集福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2015年9月至2017年8月通過手術(shù)切除的骨肉瘤組織以及相應(yīng)的癌旁組織臨床樣本共31例。利用RT-q P... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-885-5p在骨肉瘤細胞和正常成骨細胞相對表達水平

組中 miR-885-5p 表達水平顯著高于空白組和 NC 組（P <0.001），且miR-885-5p-down 中 miR-885-5p 水平明顯下調(diào)（P <0.01）， Blank 組和 NC組之間沒有差異，U6 作為內(nèi)參。上述數(shù)據(jù)表明我們成功將含有 miR-885-5p-up/ down 的慢病毒成功轉(zhuǎn)染 MG-63 細胞，并建立了高表達 miR-885-5p 和低表達miR-885-5p 骨肉瘤細胞，這將為我們進一步深入觀察細胞功能學(xué)實驗提供了基礎(chǔ)。

72h 三個時間段的 OD450 吸光度值明顯上升（P <0.05），而 miR-885-5p-down組 OD450 吸光度值明顯下降（P <0.05）。Blank 組和 NC 組細胞在 OD450 吸光度 值 無 明 顯 差 異 。 另 外 ， miR-885-5p-up 組 增 長 速 率 顯 著 增 高 ， 而miR-885-5p-down 增長速度呈下降趨勢。我們在 2 周后觀察各組細胞克隆形成率。結(jié)果如圖 4B,C 所示，相比較于Blank 組和 NC 組，miR-885-5p-up 組克隆形成率明顯增高（P <0.05），而miR-885-5p-down 組克隆形成率明顯下降（P <0.05）。上述兩個實驗結(jié)果表明 miR-885-5p 可以促進骨肉瘤細胞的增殖。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2935917