目的通過(guò)建立SD大鼠SCI模型和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞應(yīng)激模型,研究大鼠脊髓損傷后β-catenin、SIRT1和細(xì)胞凋亡表達(dá)變化,了解大鼠脊髓損傷后β-catenin與SIRT1信號(hào)通路在調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的作用。方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn):成年雄性SD大鼠90只、體重210g±10g、由錦州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)選擇分為五組,分別為假手術(shù)組（僅做椎板切除術(shù)）和損傷后3、7、14和28d組,每組18只。10%水合氯醛腹腔麻醉,在大鼠T₉-T₁₀椎體的部位實(shí)施背側(cè)正中切口,切口的長(zhǎng)度為3cm。采用改良的Allen’s打擊器,在T₁₀脊髓節(jié)段制作SCI模型,術(shù)后3、7、14、28d取材,制備冰凍切片行HE染色、尼氏染色和免疫熒光染色（n=6）,BBB評(píng)分（n=6）和Western blot（n=6）方法對(duì)脊髓組織中的β-catenin、SIRT1和Caspese-3蛋白表達(dá)進(jìn)行半定量檢測(cè)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn):原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)兩周,隨機(jī)分為四組,分別是對(duì)照組、處理組、治療對(duì)照組和治療組,用Western blot和免疫熒光方法對(duì)細(xì)胞組織中的β-cateni... 

【文章來(lái)源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠SCI模型制作

擬行 HE 染色測(cè)脊髓空洞率，尼氏染色，免疫組織學(xué)檢測(cè)灌流組織從蔗糖溶液取出，1×PBS 清洗，切取距離損傷處上下 5mm 的脊T 包埋劑室溫下包埋適當(dāng)大小組織，切片機(jī)溫度調(diào)為-20℃，將組織放在，靜置半小時(shí)，包埋劑凝固，切片機(jī)刀片調(diào)好位置，連續(xù)切片，切片厚um，棄掉殘碎組織，每張載玻片放 4 個(gè)組織切片，切片室溫靜置 2h,放置-。

β-catenin 陽(yáng)性表達(dá)位于脊髓灰質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核(圖 9)，對(duì)照組可見(jiàn) -catenin 少量表達(dá)， 急性脊髓損傷 3d 后β-catenin 陽(yáng)性表達(dá)神經(jīng)元數(shù)量開(kāi)始增加，7d 時(shí)陽(yáng)性表達(dá)神經(jīng)元最多，隨后表達(dá)有所下降（P<0.05）；SIRT1 陽(yáng)性表達(dá)在 SCI 后 3 天后逐漸增加，28d 表達(dá)量最高（P<0.05）（圖 10）。2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)LiCL 治療組與處理組對(duì)比，蛋白β-catenin 表達(dá)水平明顯增高（P<0.05）；而蛋白 SIRT1 表達(dá)則是降低（P<0.05）（圖 11）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)創(chuàng)傷性脊髓損傷流行病學(xué)和疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J]. 陳星月,陳棟,陳春慧,王凱,唐笠,李宇哲,吳愛(ài)憫.  中國(guó)循證醫(yī)學(xué)雜志. 2018(02)
[2]脊髓損傷的流行病學(xué)研究[J]. 唐智生,毛容秋.  廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(05)



本文編號(hào)：2925716