七氟醚后處理對小鼠心肌缺血/再灌注損傷中己糖激酶Ⅱ的影響
發(fā)布時間:2020-12-14 23:25
目的:探討己糖激酶(hexokinase,HK)在七氟醚后處理調(diào)控線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,m PTP)開放減輕心肌缺血再灌注損傷中的作用。方法:將成年雄性C57BL/6小鼠隨機分為假手術組(Sham組)、缺血再灌注損傷組(IRI組)和七氟醚后處理組(SPost C組)。觀察小鼠心率血壓乘積、心肌梗死面積、細胞凋亡率、線粒體超微結構變化、心肌組織線粒體和胞漿中己糖激酶的含量及活性、m PTP開放程度。結果:與IRI組相比,SPost C組心率血壓乘積增加(33650.0±5095.4bpm·mm Hg vs 40444.3±4985.4bpm·mm Hg,P<0.05)梗死面積降低(44.6±4.7%vs 36.8±1.5%,P<0.05)、心肌細胞凋亡率降低(38.7±3.0%vs31.6±2.2%,P<0.05)、線粒體Flameng評分降低(3.6±0.3 vs 2.3±0.5,P<0.05)、線粒體己糖激酶活性增加(26.3±2.3%vs 31.3±2.9%,P<0....
【文章來源】:新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對照表
摘要
Abstract
前言
研究內(nèi)容與方法
1 實驗方法
1.1 實驗對象
1.2 實驗試劑、耗材與儀器
1.2.1 主要試劑與耗材
1.2.2 主要儀器
1.2.3 實驗試劑的配制
1.3 實驗分組及干預措施
1.4 在體小鼠心肌缺血再灌注損傷模型的制備
1.4.1 麻醉
1.4.2 手術操作
1.4.3 缺血、再灌注及七氟醚后處理
1.4.4 動物處死及心肌組織標本留取
1.5 小鼠心臟功能測定
1.5.1 小鼠心率測定
1.5.2 小鼠無創(chuàng)血壓監(jiān)測
1.5.3 心率血壓乘積計算
1.6 TTC法測定小鼠心肌梗死面積
1.7 TUNEL法測定細胞凋亡率
1.7.1 新鮮組織冰凍切片制備
1.7.2 TUNEL法檢測細胞凋亡率
1.8 透射電鏡觀察線粒體超微結構變化
1.9 Dounce勻漿法分離提取小鼠心肌組織線粒體
1.10 Western Blotting法心肌組織HK Ⅱ蛋白表達
1.10.1 蛋白提取
1.10.2 蛋白濃度測定及蛋白樣品制備
1.10.3 蛋白電泳和濕法轉(zhuǎn)膜
1.10.4 抗體反應
1.10.5 曝光及圖像采集
1.11 分光光度法測定小鼠心肌組織HK活性
1.12 mPTP開放程度測定
1.13 統(tǒng)計學方法
實驗結果
1 各組心臟功能變化
2 各組心肌梗死面積
3 各組細胞凋亡率
4 各組線粒體超微結構變化
5 各組心肌組織己糖激酶Ⅱ含量的變化
6 各組小鼠心肌組己糖激酶活性的變化
7 各組mPTP開放程度測定
討論
小結
致謝
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文
新疆醫(yī)科大學碩士研究生學位論文導師評閱表
【參考文獻】:
期刊論文
[1]缺血預適應對青年與老年大鼠缺血/再灌注心肌氧化應激及線粒體功能的影響[J]. 柴囡楠,張昊,王俊瑩,李玲旭,趙雅君. 中國病理生理雜志. 2016(10)
本文編號:2917199
【文章來源】:新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
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摘要
Abstract
前言
研究內(nèi)容與方法
1 實驗方法
1.1 實驗對象
1.2 實驗試劑、耗材與儀器
1.2.1 主要試劑與耗材
1.2.2 主要儀器
1.2.3 實驗試劑的配制
1.3 實驗分組及干預措施
1.4 在體小鼠心肌缺血再灌注損傷模型的制備
1.4.1 麻醉
1.4.2 手術操作
1.4.3 缺血、再灌注及七氟醚后處理
1.4.4 動物處死及心肌組織標本留取
1.5 小鼠心臟功能測定
1.5.1 小鼠心率測定
1.5.2 小鼠無創(chuàng)血壓監(jiān)測
1.5.3 心率血壓乘積計算
1.6 TTC法測定小鼠心肌梗死面積
1.7 TUNEL法測定細胞凋亡率
1.7.1 新鮮組織冰凍切片制備
1.7.2 TUNEL法檢測細胞凋亡率
1.8 透射電鏡觀察線粒體超微結構變化
1.9 Dounce勻漿法分離提取小鼠心肌組織線粒體
1.10 Western Blotting法心肌組織HK Ⅱ蛋白表達
1.10.1 蛋白提取
1.10.2 蛋白濃度測定及蛋白樣品制備
1.10.3 蛋白電泳和濕法轉(zhuǎn)膜
1.10.4 抗體反應
1.10.5 曝光及圖像采集
1.11 分光光度法測定小鼠心肌組織HK活性
1.12 mPTP開放程度測定
1.13 統(tǒng)計學方法
實驗結果
1 各組心臟功能變化
2 各組心肌梗死面積
3 各組細胞凋亡率
4 各組線粒體超微結構變化
5 各組心肌組織己糖激酶Ⅱ含量的變化
6 各組小鼠心肌組己糖激酶活性的變化
7 各組mPTP開放程度測定
討論
小結
致謝
參考文獻
綜述
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]缺血預適應對青年與老年大鼠缺血/再灌注心肌氧化應激及線粒體功能的影響[J]. 柴囡楠,張昊,王俊瑩,李玲旭,趙雅君. 中國病理生理雜志. 2016(10)
本文編號:2917199
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