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聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)依賴的細(xì)胞損傷在體外循環(huán)后腦損傷機(jī)制中的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2020-12-10 19:18
  目的本實(shí)驗(yàn)是以中國雄性小型豬為實(shí)驗(yàn)對象,建立深低溫停循環(huán)后動物大腦損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)P?通過神經(jīng)系統(tǒng)損傷評分表評判中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷水平,利用DWI檢測技術(shù)明確腦損傷部位及取材,制作冰凍切片和石蠟切片,采用顯微鏡觀察HE染色,電鏡染色,Tunel染色及PARP-1免疫組化染色結(jié)果,從而明確PARP介導(dǎo)的細(xì)胞受損情況在深低溫停循環(huán)后出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥中所發(fā)揮的作用,為術(shù)后腦損傷的預(yù)防和治療提出一個新的線索。方法本實(shí)驗(yàn)所使用的動物符合實(shí)驗(yàn)動物的管理?xiàng)l例。1.選取中國雄性微小型豬15頭,分成對照組(n=5)、實(shí)驗(yàn)組(n=5),實(shí)驗(yàn)組又分成單純體外循環(huán)(CPB)組(n=5)和深低溫停循環(huán)(DHCA)組(n=5)。對照組給予全身麻醉,不給予體外循環(huán)操作;CPB組除不給予深低溫操作外,其余手術(shù)步驟與DHCA組一樣。行深低溫停循環(huán)操作,術(shù)后給予心電監(jiān)測、多巴胺等血管活性藥物給予循環(huán)支持,確保實(shí)驗(yàn)動物存活;2.動物模型DWI影像:在手術(shù)開始前1天,給所有動物的頭部行DWI檢查作為實(shí)驗(yàn)對比結(jié)果,以排除實(shí)驗(yàn)動物原有的腦組織損傷病灶;手術(shù)結(jié)束后2天,再次行活體動物腦的DWI檢查,并行手術(shù)前、手術(shù)后1天及2天神經(jīng)行為系... 

【文章來源】:沈陽醫(yī)學(xué)院遼寧省

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)依賴的細(xì)胞損傷在體外循環(huán)后腦損傷機(jī)制中的實(shí)驗(yàn)研究


圖2對照組DWI顯像

海馬,皮質(zhì),病灶


7.結(jié)果??5只實(shí)驗(yàn)組動物手術(shù)過程中生命體征安穩(wěn),術(shù)后全部存活,但表現(xiàn)出不同程??度的腦受損癥狀,如不能正常直立行走等。手術(shù)完成后1天時和2天時予體外??循環(huán)組大腦神經(jīng)行為評分對照,對照組評分前后沒有差別,且都大于12分,CPB??的評分與前相比有較大差別,分?jǐn)?shù)在10-11,DHCA組評分在7-10分范圍內(nèi)。??全部動物的腦部均行術(shù)前和術(shù)后2天的DWI檢查。以術(shù)前DWI檢查影像表現(xiàn)??為參照,排去原有的受損病灶的影響。對照組術(shù)后DWI影像表現(xiàn)較術(shù)前比無明??顯差別,沒有病灶。CPB術(shù)后DWI影像表現(xiàn)較手術(shù)之前對比,可見異常病灶,??深低溫停循環(huán)組(圖1-2)比對照組(圖1-1)異常病灶多,其病灶多數(shù)存在大腦皮層和海馬CA1區(qū)。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)創(chuàng)建DHCA后腦組織受損的動物模型具有義,DWI檢測能發(fā)現(xiàn)初期病發(fā)灶。??

腦組織,海馬,開顱


大腦皮層和海馬CA1區(qū)。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)創(chuàng)建DHCA后腦組織受損的動物模型具有意??義,DWI檢測能發(fā)現(xiàn)初期病發(fā)灶。??圍Hi??圖2對照組DWI顯像?圖3?DHCA組DW丨顯像(可見皮質(zhì)??及海馬明顯高信號區(qū))??(二)腦組織的取材及腦標(biāo)本切片的制備??1.腦組織取材固定及腦大體標(biāo)本切片的制備??用開顱電鉆及線鋸開顱,拿掉頭骨,將腦組織小心完整取出(圖2-1),根??據(jù)DWI顯示的異常病灶的部位,取出海馬CA1區(qū)和頂葉皮層組織,分別放置含??14??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號:2909238

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