[目的]課題組前期研究表明萬(wàn)古霉素陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合魔芋葡甘聚糖／納米羥基磷灰石/殼聚糖（konjac glucomannan/nano-hydroxyapatite/chitosan, KHC）骨替代支架材料對(duì)兔感染性骨缺損模型具有良好的抗感染性及骨修復(fù)活性,KHC骨替代支架是如何誘導(dǎo)新骨形成是KHC骨替代材料研發(fā)過(guò)程中必須搞清楚的一個(gè)問(wèn)題,通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究KHC骨替代支架對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、成骨細(xì)胞增殖、分化等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,從BMPs信號(hào)通路及FGFS/FGFR信號(hào)通路探討KHC骨替代支架材料的成骨誘導(dǎo)機(jī)制。[方法]第一部分1.采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)擴(kuò)增C57BL小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）.通過(guò)形態(tài)學(xué)及生物功能鑒BMSCs。2.在倒置相差顯微鏡、掃描電鏡下觀察BMSCs在KHC骨替代支架上的生長(zhǎng)、形態(tài)和黏附情況。3.KHC骨替代支架與BMSCs復(fù)合培養(yǎng)于24孔板中,以單純的BMSCs培養(yǎng)為陰性對(duì)照,以0.64%苯酚與BMSCs復(fù)合培養(yǎng)為陽(yáng)性對(duì)照,在24h、48h、72h收集樣本,利用MTT法檢測(cè)BM... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１骨形成過(guò)程??

??圖１－１１掃描電鏡下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（Ｘ５００）?．．??圖１－１２掃描電鏡下ＫＨＣ骨替代支架ＢＭＳＣｓ形貌（ｘｌＯＯＯ）??掃描電鏡下ＫＨＣ表面呈現(xiàn)凹凸不平多孔的表面形貌，能譜分析分析結(jié)果表明??ＫＨＣ骨替代支架表面主要含有巧、憐、氧、碳元素。（圖１－１３）??７．６??Ｃａ??６．１?－??４．６?—??ＫＣｎｔ??３。－?Ｐ??１．Ｓ?－?〇??ｌｌｉ—．．．．－－??１．６０?２．００?３．００?４．０Ｄ?５．００?６．００?７．００?８．００??Ｅｎｅｒｇｙ?－?ｋｅＶ??圖１－１３?ＫＨＣ

為了研巧ＫＨＣ骨替代支架對(duì)成骨細(xì)胞的影響，本研究利用ｑＰＣＲ方法對(duì)ＫＨＣ骨??替代支架上ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１成骨細(xì)胞的成骨分化基因（Ｒｕｎｘ２，?ＢＭＰ－４，?ＢＭＰＲ－１?Ａ，??ＦＧＦＲ－ｌ）進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖２－５所示，陰性誘導(dǎo)組Ｒｕｎｘ２在２ｗ時(shí)表達(dá)??量達(dá)到最高，ＫＨＣ骨替代支架材料在Ｉｗ和３ｗ時(shí)表達(dá)受抑制，在２ｗ時(shí)表達(dá)量達(dá)最??高，在３ｗ時(shí)同種異體人工骨Ｒｕｎｘ２表達(dá)量達(dá)最高。隨著時(shí)間的推移各組ＢＭＰ－４表??達(dá)置逐漸増高，２Ｗ時(shí)各組ＢＭＰ－４表達(dá)水平達(dá)到最高，ＫＨＣ骨替代支架誘導(dǎo)培養(yǎng)??組ＢＭＰ－４明盈高于其他組，３ｗ時(shí)各沮ＢＭＰ－４表達(dá)量均略有下降。隨著時(shí)間推移??ＫＨＣ骨替代支架普通培養(yǎng)基培養(yǎng)組ＢＭＰ艮Ｉ?Ａ表達(dá)量逐漸升高，第３ｗ時(shí)達(dá)３．２倍。??隨著時(shí)間的推移各姐ＦＧＦＲ－１表達(dá)量組建增高，在第Ｈｗ達(dá)到最高峰，前兩周??ＦＧＦＲ－１表達(dá)均受到不同程度的抑制，在第３ｗ時(shí)ＦＧＦＲ－１化學(xué)誘導(dǎo)組表達(dá)量高于未??誘導(dǎo)組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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