發(fā)布時間：2020-12-06 17:13

　　目的探究黃芪甲苷對退變髓核細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制。方法原代培養(yǎng)正常與退變髓核細(xì)胞并觀察,免疫組化檢測細(xì)胞中膠原蛋白Ⅱ（collagenⅡ）的表達(dá);分別采用20、40、60、80μg/mL的黃芪甲苷處理細(xì)胞,通過CCK-8和MTT試劑盒檢測細(xì)胞活力和增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況;Western blotting檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax和沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1（SIRT1）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助激活因子-1（PGC-1α）的表達(dá)及其乙�；土姿峄�;比色法檢測丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）、β-galactosidase和三磷酸腺苷（ATP）的含量。結(jié)果與正常髓核細(xì)胞相比,退變髓核組織中壞死細(xì)胞更多,且collagenⅡ表達(dá)降低;細(xì)胞經(jīng)不同濃度黃芪甲苷處理后,40μg/mL黃芪甲苷不僅能顯著提高退變髓核細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖并抑制其凋亡,而且能上調(diào)細(xì)胞中SIRT1、PGC-1α的蛋白表達(dá)和PGC-1α磷酸化水平,下調(diào)PGC-1α乙酰化水平,增加SOD和ATP含量,降低MDA和β-galactosidase含量。結(jié)論黃芪甲苷可能通過激活SIR... 

【文章來源】：西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016年05期 第743-747頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 研究對象
    1.2 方法
        1.2.1 髓核細(xì)胞的原代細(xì)胞篩選及培養(yǎng)
        1.2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測髓核細(xì)胞內(nèi)collagenⅡ的表達(dá)
        1.2.3 CCK-8試劑盒檢測髓核細(xì)胞活力
        1.2.4 MMT法測定髓核細(xì)胞的增殖能力
        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.6 丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、三磷酸腺苷（ATP）、β-糖苷酶（β-galactosidase）活性的測定
        1.2.7 Real-time PCR檢測基因mRNA表達(dá)
        1.2.8 Western blotting檢測蛋白及其乙�；�、磷酸化水平
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 人椎間盤正常髓核細(xì)胞和退變髓核細(xì)胞的形態(tài)及collagenⅡ的表達(dá)
    2.2 低濃度黃芪甲苷能提高退變髓核細(xì)胞的活力
    2.3 黃芪甲苷促進(jìn)退變髓核細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡
    2.4 黃芪甲苷對退變髓核細(xì)胞中氧化反應(yīng)相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2.5 黃芪甲苷對退變髓核細(xì)胞中SIRT1/PGC-1α信號通路的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]PGC-1α的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和翻譯后修飾[J]. 閆春雷,黃欣,蘇樂群.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2015(01)
[3]黃芪多糖誘導(dǎo)成熟的樹突狀細(xì)胞腫瘤疫苗體外抗腫瘤作用的實驗研究[J]. 荊雪寧,邱波,王金鳳,武永剛,武繼彪,陳丹丹.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2014(09)
[4]沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1與軟骨細(xì)胞[J]. 胡斌,徐宏光,宋俊興.  國際骨科學(xué)雜志. 2012(04)
[5]中藥血清對大鼠bMSCs體外成軟骨分化中Col2a1和Acan表達(dá)的影響[J]. 錢曉偉,潘丹岷,譚湘陵,張愛國,蔡建平.  時珍國醫(yī)國藥. 2012(02)
[6]黃芪甲苷對關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞功能影響的實驗研究[J]. 劉維統(tǒng),王躍,郝鵬,呂波,董巍.  實用醫(yī)院臨床雜志. 2009(04)



本文編號：2901741